Hidrológiai Közlöny 2011 (91. évfolyam)
6. szám - LII. Hidrobiológus Napok: „Alkalmazott hidrobiológia” Tihany, 2010. október 6-8.
43 DGGE sávok egy részének bázissorrend elemzését is elvégeztük (1. táblázat). Sikerült azonosítani egy pikoeukarióta algát, ami a Nannochloris nemzetségbe tartozott, a pontos faji besorolásra azonban a meghatározásra került DNS szakasz rövidsége és a SynechococcusoVhoz hasonlatos taxonómiai bizonytalanságok (Henley és mtsai., 2004) miatt nem volt lehetőségünk. • A csoport • C csoport • PD1 csoport • egyéb mintavétel helye mintavétel Időpontja vizsgált gén/régió PCR speclfttésa klónkönyvtár mérete Fertő tó. nyílt víz 2004. ápr. 28. 16S rDNS pro- ós oiicarióta algák 154 klón Fertő tó. Rákosr-óböl 2004. ápr. 28. 16S rDNS pro- ós eukarióta algák 167 klón Fertő tó. nyílt víz 2004. ápr. 28. cpcBA-IGS Synochococctisok 69 klón legközelebbi rokon ( GenBank) hasonlóság rendszertani csoport CHLOROPHYTA Nannochloris sp. 100% Trebouxiophyceae Chlamydomonas spp. 94,5-99,3% Chlamidomonadales Phacotus/Pteromonas / Wislouchiella 100% Chlamydomonadales Pseudomuriella sp. 100% HAPTOPHYTA Chrysochromulina sp. 100% Prymnesiales Pavlova vir esc ens 97,9% Pavlovales CILIOPHORA Cyclidium glaucoma 99,2% Scuticociliatia Oxytricha longa 98,2% Stichotrichia Balanion masanensis 94,9% Halteria grandinella 97,0% Stichotrichia Rimostrombidium lacustris 97,8% Choreotrichia STRAMENOP1LES Pseudopirsonia mucosa 95,2% Rhizidiomyces apophysatus 91,4% Hyphochytriomycetes APICOMPLEXA Colpodella edax 86,8% Colpodellidae CERCOZOA Cercomonas plasmodialis 92,8% Cercomonadida FUNGI Spiromyces minutus 91,1% Kickxellomycotina ^r T— f-- oá 2 T _ -- ™ V 3 t t _ d ce =! cc d ct ^ O) rj (N slii 2. ábra. A Fertő tó két magyarországi mintavételi pontjáról származó planktonikus vízminta klónozásának eredménye, a klánok megoszlása A többi molekuláris módszerrel kimutatott csoport egy részének előfordulását hagyományos mikroszkópos vizsgálatok is alátámasztották (pl. Chlamydomonas sp.; Chrysochromulina parva). A meghatározott filotípusok jelentős része azonban csak kis hasonlósági értékeket mutatott a nukleotid adatbázisokban megtalálható fajok DNS-éhez. Ezt két dologgal magyarázhatjuk: (i) a DNS származhat a tudományra új fajból vagy (ii) leírt, de genetikai alapon nem jellemzett (vagy más gén/régió alapján jellemzett) fajból. Összegzésként tehát elmondhatjuk, hogy (i) azonosítottuk a Fertő tó vizében meghatározó szerepet játszó fotoautotróf pikoplankton képviselőit; (ii) a vizsgált mintáink jelentős térbeli és időbeli heterogenitást mutattak az eukarióta mikrobaközösség összetételét tekintve (jól tükrözve a Fertő tó mozaikos jellegét); (iii) az egyes csoportok esetében számos, korábban még nem azonosított, egyedi képviselő jelenléte valószínűsíthető a Fertő tó vizében. 1. táblázat. Az egyes DGGE sávok bázissorrend elemzésének eredményei (a különböző specifitású vizsgálatok eredményeinek összegző táblázata) g M — -— jMt g M w m MS? — u £ 1 era «M — u £ 1 , E • n n fii —• — _ 'C; 3. ábra. A. a Fertő tó planktonikus Chlorophyta közösségének DGGE mintázata (2008. október - 2009. október, Ruster Poschen); B. a Fertő tó Ciliata közösségének DGGE mintázata (2008 végén, 1L - nyílt víz Iílmitznél, RP - Ruster Poschen) További célunk, hogy a molekuláris biológiai eredményeinket kibővítsük és összevessük a fizikai-kémiai és mikroszkópos vizsgálatok eredményeivel a tó apró, planktonikus létformái által meghatározott folyamatok részletesebb megértése érdekében. Köszönetnyilvánítás A mintavételezések és a minta előkészítés során köszönjük Németh Balázs segítségét. A minták feldolgozásában Nicole Krohn, Stephan Karl, Vajna Balázs és Vida Márton segített. A kutatást az OTKA (K 73369) támogatta. Irodalom Castenholz, R.W., Norris, T.B. (2005) Revisionary concepts of species in the Cyanobacteria and their applications. - Algol. Stud. 117: 53-69 Dopheide, A.. Lear. G., Stott, R . Lewis, G. (2008) Molecular characterization of ciliate diversity in stream biofilms. - Appl. Environ. Microbiol. 74: 1740-1747. Felföldi T„ Somogyi B., Márialigeti K., Vörös L. (2008) Duna-Tisza közi szikes tavak pikoplanktonjának molekuláris biológiai jellemzése. - Hidrol. Közi. 88: 55-57. Felföldi T„ Somogyi B . Vörös L„ Vida M„ Márialigeti K. (2010) Molekuláris biológiai módszerek alkalmazásának lehetőségei sekély tavaink mikroszkopikus méretű eukariótáinak azonosításában. Hidrol. Közi. 90: 23-25. Henley, W.J., Hironaka, J.L., Guillou, L., Buchheim, M.A., Buchheim, J. A., Fawley, M.W., Fawley, K.P. (2004) Phylogenetic analysis of the 'NannochlorisAike' algae and diagnoses of Picochlorum oklahomensis gen. et sp. nov. (Trebouxiophyceae, Chlorophyta). -Phycologia 43: 641-652. Moro, C.V., Crouzet, O., Rasconi, S., Thouvenot, A., Coffe, G., Batisson, I., Bohatier, J. (2009) New design strategy for development of specific primer sets for PCR-based detection of Chlorophyceae and Bacillariophyceae in environmental samples. - Appl. Environ. Microbiol. 75: 5729-5733. Padisák, J., Dokulil, M. (1994) Meroplankton dynamics in a saline, turbulent, turbid shallow lake (Neusiedlersee, Austria and Hungary). Hydrobiologia 289: 23-42.
