Hidrológiai Közlöny 2009 (89. évfolyam)

6. szám - L. Hidrológiai Napok: "A hazai hidrobiológia ötven éve" Tihany, 2008. október 1-3.

152. HIDROLÓGIAI KÖZLÖNY 2009. 89. ÉVF. 6. SZ. Rippka R., Deruelles J., Waterbury J., Herdman M., Stanier R. (1979) Generic assignments, strain histories and properties of pure eultures of cyanobacteria. J. Gen. Microbiol. 111:1-61. Schlereth A., Becker C., Horstmann C., Tiedemann J., Müntz K. (2000) Comparison of globulin mobilization and cysteine proteinases in embryogenic axes and cotyledons during germination and seedling growth of vetch (Vicia sativa L.). Journal of Experimentál Botany 51 (349): 1423-1433. Tamás G. (1965) Microcystis-tömegvegetáció a Balatonon. Botanikai Közlemények. 52. 95-101. Vasas G., Gásprár A., Surányi G., Batta G., Gyémiánt Gy., M.Hamvas M., Máthé Cs., Grigorszky L, Molnár E., Borbély G. (2002a) Capillary Elecfiophoretic assay and purification of cylindrospermopsin, a cyanobacterial toxin from Aphanizomenon ovalisporum by plánt test (Blue-Green Sinapis Test). Analytical Biochem. 302: 95-103 Vasas G., Padisák J., M-Hamvas M., Máthé Cs., Molnár E., Surányi Gy., Grigorszky I., Borbély Gy. (2002b) A cilindrospermopszin termelés analitikai vizsgálata Cylindrospemopsis raciborskii izolátumokban. Hidrológiai Közlöny 82: 143-144. Vasas G., Gáspár A., Páger C., Surányi G., Máthé C., M-Hamvas M., Borbély G. (2004) Analysis of cyanobacterials toxins (anatoxin-a, cylindrospermopsin, microcystin-LR) by capillary electrophoresis. Electrophoresis 25: 108-115. Vierstra R.D. (1996) Proteolysis in plants: mechanisms and functions. Plánt Mol. Biol. 32: 275-302. Vörös L., V. Balogh K. (1997) A balatoni fitoplankton fotoszintézisének karakterisztikái Hidrológiai Közlöny 77: 9-10. Whitton B. A. (2002) Phylum Cyanophyta. In: D.M. John, B. A. Whitton and A. J. Brook (eds) The freshwater algal flóra of the British Isles. Univesity Press, Cambridge. 94. Detection of protease activity from bloom-forming cyanobacterial species M. Mikóné .Hamvas, G. Vasas, E. Tontku, K. Jámbrik, Cs. Máthé, D. Beyer, V. B. Béres and G. Borbély University of Debrecen, Department of Botany, H-4010. Debrecen, Egyetem tér 1. Abstract: Cyanobacteria strains that cause/produce massive water blooms and have the capacity to synthesize toxins produce a wide rangé of other bioactive molecules, which can take part in the harmfúl effects of toxic waterblooms. Proteolysis is essential for many aspects of physiology and development of pro- and eukaryotic cells/organs. Enzymes with proteolytic activity are responsible for cellular housekeeping and the stress response by removing abnormal/misfolded proteins, for supplying aminő acids needed to make new proteins. We analysed the proteolytic activity of three potential toxic cyanobacteria Cylindrospermopsis raciborskii, Anabaena ovalisporum and Microcystis aeruginosa on gelatine-activity gels. The gelatine-zymograms proved high specific proteolytic activities not only in the cell-fractions but in the supernatants as well. The gelatine-zymograms were characteristic for all strains, with common proteases at high (>100 kDa) molecular weight. The highest proteolytic activity was characteristic of the A. ovalisporum strain. The isoenzymepattems have been changing during the growth of eultures; the specific activity of protease enzymes in the cells decreased. In the fiitűre we would like to get more information about these enzymes and their fúnetion. Keywords: Aphanizomenon ovalisporum, Cylindrospermopsis raciborskii, Microcystis aeruginosa, protease. Molekuláris biológiai vizsgálatok a harkányfurdői kutak gyógyvizének baktériumközösségein Miseta Roland, Palatinszky Márton, Márialigeti Károly, Borsodi Andrea ELTE Mikrobiológiai Tanszék; 1117. Budapest, Pázmány Péter sétány 1/C Kivonat: A Harkányi Gyógyfürdőhöz tartozó gyógyvíz-kutak magas szulfidtartalmú vizének baktériumközösségeit 2006-ban és 2007-ben szezonális mintavételezést követően molekuláris biológiai módszerekkel tanulmányoztuk. A két langyos vizű büdöstapolcai és a harkányi 6-os sz. termálkút vízmintáinak szűréssel tömöritett biomasszájából a közösségi DNS kivonását követően a 16S rRNS génszakaszt univerzális bakteriális primerekkel felszaporítottuk. A bakteriális közösségszerkezetek összehasonlítását és a változásokat denaturáló gradiens gélelektroforézis (DGGE) segítségével vizsgáltuk, a filogenetikai diverzitás feltárását klónkönyvtárak elemzésével végeztük el. A DGGE vizsgálatok eredményei nemcsak a mintavételi területek közti különbségekre, hanem az egyes területek szezonális változásaira is rámutattak. A büdöstapolcai minták baktériumközösségeit reprezentáló csíkok fő sávjaikban megegyeztek, ami a két kút hasonló domináns fajösszetételére utal, viszont e két kút sávmintázata nagymértékben eltért a termálkútétól. A DGGE sávok mintázatában és intenzitásában a legnagyobb eltérést mindhárom kút tavaszi mintája esetében figyeltük meg. Négy klónkönyvtár elemzése során 16, főként kén-oxidáló, illetve szulfátredukáló baktérium taxont azonosítottunk. A langyos vizű kutak klónkönyvtárainak fő közösségalkotói az e-proteobaktérium, a Desulfocapsa sulfexigens, valamint a Thiothrix fructosivorans és a Thiothrix unzii klónok voltak, míg a termálkút baktériumközösségében a termofil Sulfurihydrogenibium, valamint a Thiomonas nemzetségek képviselőit sikerült azonosítanunk. Az obligát és fakultatív kemolitotróf anyagcseréjü kénbaktériumokkal nagy bázissorrend hasonlóságot mutató klónok jelenléte arra utal, hogy a vizsgált harkányi gyógyvizeket a speciális környezeti feltételekhez adaptálódott, évszakosan változó és a kén körforgalmában résztvevő mikroba populációk jellemezik. Kulcsszavak:Gyógyvíz, kemolitotróf, kénbaktérium, DGGE, klónkönyvtár , , , .,, , fizikai tulajdonságú vizet adnak. A termálkutak hőmérBevezetes es célkitűzés séklete 60-62 °C, szulfid-koncentrációjuk 10,7-12,7 mg l

1. Magyarorszag kedvező termeszeti adottsagai reven kte- A , vizü karsztkutak vize 1

7_

2

4 hőmérsékletű, melkedoen gazdag termál es gyógyvizekben. Az orszagban szulfldtartalmu

k j >j_

7 8 r< jellemzően karsztos termalviz-tarolo rendszerekben atszi- vizsgálatainkba

n Harkányfurdő három kútjából gyűjtött vargott víz magas asvanyianyag-tartalmu, a pint bomlasa- ó ize

k baktérium-közösségeit tenyésztéstől független bol szulfidossá válhat. Ilyen termalkarsztos bazisra telepult molekuláris bloló i

a, módszerekkel vizsg

áituk, abból a céla Villanyi-hegyseg deli elotereben fedett karsztrogokon fek- b

ó, h betekintést nyelj

ünk a lokális kén-körforgalomvo Harkany. Az asvanyianyag-osszetetele (hidrogenkarbo- ban js résztyevő közössé k összetételébe é

s változásaiba, nat szulfid, fluond) miatt Europaban egyedülálló harkanyi viz álati és módszere

k gyógyvíz vizbazisa mészkőrétegekben tarolt meleg es lan- A büdöst lcai kutakb

ó] (BT1 BT2) 2006. novemberégyos karsztvíz, melyet a 48 m mélységű harkany, termalku- ma a 6 gz termálkútta| kiegészítve (H

T) 2007. ápritakbol, valamint a 80 m mélységű langyos vizű budostapol- Usáb júniusba

n, augusztusb

an és 2008. áprilisban vettünk cai kutakból termelnek ki. A termálfürdő negy termalkútja, vízmintákat valamint két langyos vizű. ásványvizes; kútja (Büdöstapolca- ^^mintavételhez 5 literes fertőtlenített műanyag kanná1, Büdostapolca-2) szolgáltatja a furdo gyógyvizet. A yogy- ^ használtunk A biomassz

a tömörítést membránszűréssel viz-kutak egesz evben közel allando kémiai osszetetelu es centriftlgálással végeztü

k. A vízmintákat 0,45 ^m pórus-