Hidrológiai Közlöny 1975 (55. évfolyam)

5. szám - Kneffel Zsuzsanna–Dr. Dési Illés–Sárosi Éva: Vizek kisfokú peszticid szennyezettségének kimutatása élettani működés változásán alapuló módszerrel

Kneffel Zs.—

Dr. Dési I.—Sárosi E.: Vizek kisfokú peszticid Hidrológiai Közlöny 1975. 5. sz. 225 1. kép. Az Anodonta cygnea kopoltyúredőiből kimosott 0,1— 0,2 mm nagyságú lárvák, a glochidiumok Bild 1. Die aus den Kiemenfalten der Anodonta cygnea zugewaschenen Larven von 0,1 — 0,2 mm Grösse, die Olochidiia rációnként 300 ml vízbe széles szájú pipettával 20—30 egyedet helyeztünk. A vizsgálatokat itt is háromszor ismételtük. Nem értékeltük azokat a kísérleti eredményeket, amikor a kontroll csoportban 10%-nál nagyobb volt a pusztulás. Azt a peszticid koncentrációt tekintettük ártalmatlannak, ahol a szervezetek pusztulása 10% alatt volt. II. Az általunk kidolgozott teszt Anodonta cygnea glochidium (tavikagyló-lárva) teszt Felhasznált lárvák száma: kb. 6000 db Az anodonta cygnea lárvák, a glochidiumok, az ivarérett kagylók kopoltyú redőiben fejlődnek október és március között. Ha az ivarérett egyedek kopoltyú redőit megnyitjuk, tiszta vízzel kirázhatjuk a 0,1—0,2 mm nagyságú glochidiumokat (1. kép). A lárváknál a tartósan nyitott állapotban levő héjakat időnként egy-egy pillanatnyi időtartamra a közelítőizmok gyors összehúzással zárják. Tapasztalatunk szerint a növényvédőszert tartalmazó vízben a zárás gyakorisága megváltozik. Ez a változás a tesztelés alapja. A kopoltyú redőkből kimosott glochidiumokat + 7 °C-os hűtőszekrényben tartottuk, ahol a hőmérsékleti eltérés nem volt nagyobb 2 °C-nál. A vizsgálat idején a mikroszkóp tárgyasztalát jégkockával hűtöttük, mivel előkísérleteink során azt tapasztaltuk, hogy a hőmérsékletváltozás jelentős mozgásaktivitás változást okoz. A hőmérsékletállandóság biztosítása a tesztelés egyik fontos követelménye. A hűtőszekrényből kivett — előző nap kimosott — egyedeket széles szájú pipettával mélyített tárgylemezre cseppentettük, és egy percet vártunk. Ezalatt a szervezetek alkalmazkodtak a megváltozott fényviszonyokhoz. Az egy perces várakozási idő betartása a tesztelés másik fontos követelménye. A megfigyelést 12-szeres nagyítás mellett végeztük. 3 percen át számoltuk az egy látótérben levő 30—32 lárva összes aktivitását, a zárások számát Ha az aktivitás kielégítő volt (1—-2/egyed/3 perc) elkezdtük a vizsgálatokat. A növény védőszert 10"

1; 10~

2; 10~

3; 10~

4 mg/l koncentrációnak megfelelően mértük be a rendszerhez és ez után 24 órával számoltuk meg először a zárások számát. A lárvákat összesen 5 napig tartottuk a peszticiddel szennyezett vízben, és a megfigyelést naponta ismételtük. Egy-egy vizsgálati csoportba 250 lárva tartozott. Valemennyi vizsgálatnál két paralell csoportot alkalmaztunk. A kezelt csoportok mozgásaktivitását minden esetben a kontroll csoport mozgásaktivitásával hasonlítottuk össze. Az értékelésnél kiszámítottuk a 30—32 egyedet tartalmazó látóterek aktivitási együtthatóit, azaz az egy glochidiumra eső héj zárások számát. (Ez az összes aktivitások száma és az egyedszám hányadosa). Mivel minden vizsgálati csoportba 250 egyed tartozott, ezért csoportonként 8 együtthatót kaptunk. Ezután meghatároztuk valamennyi együttható logaritmusát, és ezekből Student-féle kétmintás t-próbát számoltunk. Először összehasonlítottuk az azonos koncentrációval kezelt paralelleket. Ha a kezelt csoportok paralelljei között nem volt szignifikáns különbség, akkor a kezeiteket a kontrollhoz hasonlítottuk. Ártalmatlannak ítéltük azt a koncentrációt, ahol a t-próba nem mutatott szignifikáns különbséget a kezelt és a kontroll csoport között. A nagy számban végzett t-próba az első fajú hiba megnövekedésével nem létező hatást mutathat ki, ezért módszerünk ellenőrzésére kiválasztottunk egy vizsgálat-sorozatot és azon többszempontos variancia analízissel ellenőriztük, hogy a t-próbával kapott szignifikáns különbségek valóban szignifikáns eredményeket foglalnak-e magukba. Ä varianciaanalízis kiszámítása során először megvizsgáltuk a szempontok (vizsgálati napok és különböző koncentrációk) függetlenségét. Mindhárom vizsgált szer esetében a kezelés után 24 órával a különböző koncentrációknál mért átlagos héjzárási értékekre regresszióanalízissel meghatároztuk, hogy milyen mennyiségű peszticid nem vált ki a héjzárási aktivitásban mérhető változást. Az így meghatározott érték a biztosan ártalmatlan koncentráció. Eredmények I Összehasonlítási alapul elvégzett tesztek Lebistes reticulatus (guppi) teszt A vizsgált peszticidek 10 mg/l koncentrációban a teszt szervezetek pusztulását okozták. A Baygon 20 EC ártalmatlan koncentrációja 1 mg/l, ezen koncentráció a három párhuzamos kísérletben nem okozta egyetlen egyed pusztulását sem. A Cythion és Nexion 40 EC 1 mg/l koncentrációban is még toxikus volt. Ezen két peszticid csak 0,1 mg/l koncentrációnál volt ártalmatlan. Daphnia magna teszt Ezzel a teszt módszerrel a Baygon 20 EC ártalmatlan koncentrációja 10"

2 mg/l, míg a Cythion