Fogorvosi szemle, 2004 (97. évfolyam, 1-6. szám)

2004-02-01 / 1. szám

24

FOGORVOSI SZEMLE ■ 97. évf. 1. sz. 2004.

tást és megfelelő szájhigiénia megteremtését végeztük (Baytril/Enrofloxacin 5% (Bayer) 0,2 ml/ttkg adagolása/7 nap).

PRP preparálás: A beavatkozást megelőzően 5 ml vénás vért nyertünk Curasan szeparációs kit alkalmazásával, platelet-rich plasma preparáláshoz. Az 5 ml vénás vért 0,5 ml heparin-szulfát alvadásgátlóval elegyítettük, majd 2400 rpm fordulatszámmal 10 percig szobahőmérsékleten centrifugáltuk (Hettich EBA 8S). A felülúszót leválasztottuk a sejtes frakcióról, majd újabb 10 percig 4000 rpm fordulatszámmal centrifugáltuk. A felülúszó újbóli eltávolítását követően a kémcsőben maradt 0,5 ml plasma+thrombocyta-pelletet kémcsőrázóval (Vortex Genie) szuszpendáltuk.

Műtét: A kísérleti állatok altatása im. Domitor Medetomidin-hidrochlorid (Pfizer) (az állat viselkedésétől függően 20-30 pg/kg) és Butomidor/Butorphanol (Richter Pharma AG) (0,2 mg/kg) kombinációjával történt. A megfelelő mélységű narkózis elérését követően steril műtéti körülmények között, az oldalt fekvő helyzetben rögzített állat mindkét oldali alsó 2., 3. premolárisának eltávolítása után, 3 mm átmérőjű fészekfúróval 4 mm mélyen kialakításra került a végleges csontdefektus, fiziológiás sóoldatos hűtés alkalmazásával. A mandibulában kialakított csontüregeket jobb oldalon B-TCP- vel (Cerasorb, Curasan, 500-1000 mikron szemcseméret), bal oldalon B-TCP és PRP keverékével töltöttük fel. A sebet felszívódó varratokkal (Vycril, Braun) rétegesen zártuk. Az állatokat a műtét után egy hétre gallérral láttuk el, áztatott Canine maintenance (Hill’s) kutyatápon tartva biztosítottuk a zavartalan gyógyulás feltételeit. Mivel a műtét és az azt követő posztoperatív szak fájdalommal járt, az állatoknak Butorphanolt (0,6 mg/ ttkg im) adagoltunk a beavatkozást követő egy héten át, minden nap. A képződött új csont minőségét klinikai és szövettani vizsgálattal ellenőriztük.

Szövettani preparátum készítése: A kísérleti állatokat a beavatkozást követően 6 hét és 12 hét elteltével szövettani mintavételnek vetettük alá. Szabad szemmel vizsgáltuk az augmentált területeket, hogy felismerhető-e a csontpótlásra használt anyag jelenléte. Az augmentált területekről altatásban 4 mm átmérőjű csonttrepánnal (Meisinger) 3 mm hosszú csonthengert távolítottunk el. A szövetmintát 10%-os neutrális formaiinban fixáltuk, majd műgyantába beágyazást (Durkupán) követően Diatome készülékkel metszeteket készítettünk. A preparátumokat Toluidin-kék, hematoxylin-eosin és Goldnerféle trikróm festéssel festettük. A megfestett metszeteket mikroszkóp alatt (10, 20, 40 X-es) nagyításban vizsgáltuk (Olympus 2000). Ezt követően hisztomorfometriás értékelést végeztünk. A hisztomorfometria során az augmentátum területén a mineralizált mátrix, csontszövet és lágyszövetek viszonyát a teljes terület %-ban kifejezett arányát számszerűsítve kaptuk meg. A kétoldali szövetmintát egymáshoz (egyedeken belül), illetve a változásokat (egyedek között) mértük. Az eredmények statisztikai értékelésére egyoldali kétmintás párosított Student (t) tesztet használtunk.

Eredmények

Klinikai értékelés

A hathetes gyógyulást követően a nyálkahártyával borított terület alatt szabad szemmel számos B-TCP-szemcsét lehetett látni, ami a tizenkettedik héten csak elszórtan volt felismerhető. A 12 hetes gyógyulási időt követően minden defektus esetében (fogászati szondával) csontkemény tapintatú új szövet képződését tapasztaltuk. Szabad szemmel a BTCP-vel és a thrombocyta-koncentrátummal kevert B-TCP-vel feltöltött üreg között a nyálkahártya és a perioszteum eltávolítása után egyértelmű különbség nem volt felismerhető. A feltöltött defektus helyét csak a szemfogtól mért távolság lemérésével lehetett azonosítani.

Szövettani preparátum értékelése

A tisztán B-TCP-vel végzett augmentáció esetében a granulumok kerekdedek, porózus szerkezetűek voltak, szomszédságukban - a granulumokkal szoros kapcsolatban - oszteoid szövet volt látható. Ez bizonyítja a B-TCP szövetbarát és oszteokonduktiv természetét (1. és 2. ábra). A PRP-vel dúsított augmentátum esetében a granulumok belsejében is oszteoidnak megfelelő homogén szerkezetű vörösre festődő szövethíd látható, sejtes aktivitás nélkül. A szomszédos területeken lemezes szerkezetű csontot találunk, ami érett új csont képződésére utal. A beültetés területén jelentős oszteoklaszt-aktivitás nem látható (3. és 4. ábra). Az oszteoid és a lemezes szerkezetű csont aránya a 12 hetes mintában a hathetes mintához viszonyítva nagyobb.

Hisztomorfometriás értékelés

A hisztomorfometriás eljárással számszerűen mérni lehet a szövettani metszeten elhelyezkedő egyes területeket. Eredményeinket táblázatban foglaltuk össze, mely kifejezi a csontszövet és lágyszövet %-os arányát az adott területen belül (1. és 2. táblázat). (Az összesítés nem tartalmazza a csontpótló granulumokat, ezért az összeg nem 100%.) Az egyoldali párosított mintás Student (t) próbával a hathetes minták között nem adódott szignifikáns különbség (p = 0,137), azonban a tizenkettedik héten a különbség már statisztikailag szignifikánsnak bizonyult (p = 0,033). A keményszövet/lágyszövet arány a hatodik héten a B-TCP+PRP graft esetén 52,97 %/40,27%, míg a tisztán B-TCP graft esetén 44,77%/ 52,13 %. A tizenkettedik héten a B-TCP+PRP graft esetén a keményszövet aránya tovább emelkedik 65,06% / 30,45%, míg a tisztán B-TCP graft esetében az értékek a hathetes mintával közel megegyezőek 51,09 % /42,61 %.