Fogorvosi szemle, 2000 (93. évfolyam, 1-12. szám)
2000-11-01 / 11. szám
forézis után Coomassie Brillant Blue eljárással festettük [7], hogy a megfuttatott fehérjéket láthatóvá tegyük. Az első kísérletnél a Ti02-üledéket EDTA-val és desztillált vízzel mostuk külön-külön, mintavétel 5, 30, 60 perc illetve 24 óra elteltével történt. A második vizsgálatnál a Ti02-üledéket desztillált vízzel, EDTA-val és SDS-sel mostuk külön-külön, mintavétel 5 és 30 perc mosási idő után történt. A felülúszó folyadékból vett 20pg fehérjemintákkal SDS poliakrilamid gél-elektroforézist végeztünk. A harmadik vizsgálat során történt a natív gél elektroforézis. Eredmények Az első kísérlet során készült SDS poliakrilamid gél elektroforézis leletének (1. ábra) első oszlopa mutatja, hogy a humán szérumban a legnagyobb mennyiségben albumin található. Ezzel a sávval egy vonalban található egy-egy sáv mind az EDTA-val, mind a desztillált vízzel történt mosásból vett minták elektroforézise 2-9-ig terjedő sorszámú oszlopainak mindegyikén, ami azt jelzi, hogy az albumin kötődött a Ti02-hoz, de könnyen le is vált róla, hiszen desztillált vízzel is eltávolítható volt. 1. ábra. Gél-elektroforézis a titán-dioxidról leválasztott fehérjék típusának és kötődésének vizsgálatára; az üledék mosása EDTA-val és desztillált vízzel történt külön-külön 1. oszlop: humán szérum 1 : 4 hígításban, 2. oszlop: EDTA-s mosás 5 percig, 3. oszlop: EDTÁ-s mosás 30 percig, 4. oszlop: EDTÁ-s mosás 60 percig, 5. oszlop: EDTA-s mosás 1 napig, 6. oszlop: desztillált vizes mosás 5 percig, 7. oszlop: desztillált vizes mosás 30 percig, 8. oszlop: desztillált vizes mosás 60 percig, 9. oszlop: desztillált vizes mosás 1 napig, 10. oszlop: humán szérum 1 : 4 hígításban Az EDTÁ-val történő mosásból vett minták futtatása után keletkezett oszlopokban egy másik erősen festődé sáv is van, ami olyan fehérjét mutat, amelyik erősebben kötődött a Ti02-hoz, mivel a desztillált víz nem tudta leoldani (1. ábra 2-5. oszlop). A mosási idő növelésével a minták futtatása után a sávok nem festődtek erősebben, tehát a mosás időtartamától 5 percen túl nem füg-331
