Fogorvosi szemle, 1991 (84. évfolyam, 1-12. szám)

1991-02-01 / 2. szám

Fogorvosi Szemle 84. 59—62 1991.

Semmelweis Orvostudományi Egyetem Konzerváló Fogászati Klinika (igazgató: Dr. Bánóczy Jolán egyetemi tanár),

Neurológiai Klinika (igazgató: Dr. Csanda Endre egyetemi tanár),

II. sz. Anatómiai Intézet (igazgató: Dr. Halász Béla egyetemi tanár) és Kórélettani Intézet (igazgató: Dr. Hársing László egyetemi tanár),

Budapest

A nervus alveolaris inferior átmetszésének hatása a szájnyálkahártya neurogén gyulladása II. Immunhisztokémiai vizsgálatok

DR. FAZEKAS ÁRPÁD, DR. G Y 6 R F I ADRIENNE, DR. PÓSCH ELEK,

DR. JAKAB GÁBOR, DR. В Á R T F A I ZSOLT és DR. ROSIVALL LÁSZLÓ

A kis átmérőjű, capsaicin érzékeny nociceptív afferens rostok aktiválódásával kiváltott neurogén gyulladás hatásmechanizmusában a különböző vasoactiv peptidek — így a calcitonin gene-related peptid (CGRP) — mediátor szerepe valószínű [5].

A neurogén inflammáció szájüregi lokalizációjának tanulmányozásához kapcsolódóan [3, 4] jelen kísérletünkben a CGRP előfordulását, valamint eloszlását vizsgáltuk kontroll patkányok, illetve egyoldali nervus alveolaris inferior (NAI) átmetszett patkányok szájnyálkahártyájában immunhisztokémiai módszerrel. A sensoros NAI rostkötegében Christensen [1] sympathicus efferens idegeket is kimutatott. Kísérletünkben a NAI átvágásakor elkerülhetetlen volt a sympathicus motoros ágak egyidejű átmetszése, ezért külön állatcsoportban tanulmányoztuk az egyoldali nyaki sympathectomia hatását az azonos oldali szájnyálkahártya CGRP tartalmára.

Anyag és módszer

A NAI, illetve a nyaki sympathicus törzs átmetszéséhez a kísérleti állatokat elal: tattuk (Nembutal, Abbot, Stockholm, Sweden; 30 mg kg-1; i. p.). Közvetlenül a canalis mandibulae-ba lépését követően feltártuk a NAI csatornán belüli mintegy 4 mm-es szakaszát [8], az ideget átvágtuk, s kb. 2 mm-es darabját kivágtuk. A nyaki sympathicus rostokat középvonali metszésből tártuk fel, s az egyik oldali cervicalis gangliont az ideg kb. 4 mm-es darabjával együtt távolítottuk el. A műtéti sebet lokális antibiotikum kezelés után zártuk.

A szájnyálkahártya CGRP immunreaktivitásának vizsgálatát túlaltatott beavatkozásmentes (kontroll, n = 2), jobboldalon NAI átmetszett (2, illetve 14 nappal a műtétet követően, n2 = 2; n14=2), illetve jobboldalon nyaki sympathectomizált (14 nappal a műtétet követően, n = 2) kísérleti állatokban (270—320 g testsúlyú, hím Wistar patkányok) az azonos oldali mandibulafeiet fedő nyálkahártyából vett szövetminták immunhisztokémiai feldolgozásával végeztük. A CGRP immunreaktiv rostok kimutatásához a kivágott nyálkahártya mintákat 1 héten keresztül 4% paraformaldehydet és 0,2% glutaraldehydet tartalmazó 0,1 M-os foszfát pufferben (PB) fixáltuk, 4 °C-on. Ezután a paraffinba ágyazott mintákból 30 /пи-es metszeteket készítettünk, azokat PB-ban tároltuk. A metszetek endogén peroxidáz tartalmát 0,1% zselatint és 0,01% H202-t tartalmazó TRIS/foszfát pufferrel (TBT) inaktiváltuk [10]. Ezt követte a metszetek indirekt immunhisztokémiai feldolgozása, mely során Hsu és mtsai [6] ABC (avidin-biotin-peroxydase complex) módszerét, valamint Merchenthaler és mtsai [7] eljárását használtuk.

A szövettani metszeteken való jobb tájékozódás céljából az epithel sejtek, vérerek, valamint a nyálkahártya mirigyek szemléltetésére a metszeteknél „nuclear fast red” (NFR) utófestést is alkalmaztunk.

Érkezett: 1990. július 13. Elfogadva: 1990. november 16.

59