Fogorvosi szemle, 1983 (76. évfolyam, 1-12. szám)
1983-06-01 / 6. szám
JI. Nyolc [8] belgyógyászati osztályon fekvő beteget (4 nő. 4 ffi 20—57 év között) megkértünk, hogy 24 órán át a vizsgálat előtt ne mossanak fogat. A vizsgálat napján éhgyomorra először spontán kevert nyálat vettünk, majd fémspatulával nyelvlepedéket kapartunk le. A haematológiában használatos, egyenlő nagyságú gömbvalyulatokat tartalmazó edénykékbe helyeztük el a kaparékot (0,3 g) külön-külön minden betegtől. Majd minden egyes vályulatból ismert és az eddig is alkalmazott mennyiségű NaN03-t tartalmazó mérőpohárba külön-külön saját folyadékával belemostuk a beteg saját nyelvlepedékét. Összekeverés után az oldatot 5 percig 37 °C-on inkubáltuk, majd az oldatban és a nyálban is meghatároztuk a nitrát és nitrit tartalmat. Ezzel a kontrollal megísérletük kimutatni, hogy a nitrátból való nitritté alakulás a nyelvlepedék baktériumainak hatására jön-e létre. Ennek további bizonyítására négy kontrolihoz fél-fél fiziológiás sóban oldott Kiion tablettát is tettünk az inkubálás előtt. A Kiion (Metronidazol), mint ismeretes, hatékony anaerob baktérium szaporodás-gátló szer. Nitrát meghatározása nyálból [8, 14, 15] Minta előkészítés. A nyálmintákat 16.000 ford./perc sebességgel 0 °C-on (Janetzky К—24 centrifugában) lecentrifugáljuk. így tiszta oldatot kapunk, amely biztonsággal bemérhető. Fehérjementesítés: 4 ml centrifugált nyálmintához 4 ml abs. alkoholt adunk és 10 percig 60 °C-os vízfürdőn tartjuk. A csapadékos oldatokat újból centrifugáljuk. A centrifugálási körülmények az előbbiekkel azonosak. Nitráttartalom meghatározás. Szükséges oldatok: 0,5 %-os Na-szalicilát oldat, cc. kénsav, 10 mólos nátriumhidroxid oldat, 1 mg/ml-es nátriumnitrát oldat, a standard sorhoz. »4 meghatározás menete. 5 ml mintához 1,0 ml 0,5 %-os nátriumszalicilát oldatot adunk és a vízfürdőn szárazra pároljuk. A maradékot 1,0 ml koncentrált kénsavval nedvesítjük és 10 perc múlva kb. 10 ml desztillált vízzel 25,0 ml-es normál lombikba mossuk. 7,0 ml 10 mólos nátriumhidroxid oldat hozzáadása után jelig töltjük és 20 perc múlva 410 nm-en desztillált vízzel szemben HITACHI spektrofotométeren fotometráljuk. A mennyiségi méréshez minden alkalommal standard sort készítünk oly módon, hogy a nyálminták helyett 5 ml vízből indulunk ki, és ehhez adjuk az 50 /Л, 100 pl, és 200 pl mennyiséget 1 mg/ml nátriumnitrát standardból. Nitrit meghatározása nyálból [8, 14, 15] Minta előkészítése. A nyálmintákat 16.000 ford./perc sebességgel 0 °C-on lecentrifugáljuk Janetzky К—24 centrifugán 10 percig. A tiszta 1 ml mintához 0,5 ml 18 %-os ZnS04 -7 H20 oldatot, majd 0,2 ml 1,5 mólos nátriumhidroxid oldatot adunk és újból az előbbiekhez hasonló módon centrifugáljuk. A szükséges oldatok: 40 mM/liter szulfadimidin, 1 %-os ammóniumszulfamát, 1,5 %-os N (1—naftil—etilén—diamin). HCL, 100 pM/liter KN02 oldat (0,170 g), 100 ml 2 NHC1. Meghatározás menete. 1 ml szulfadimidin oldathoz 1 ml mintát adunk, majd 0,5 ml 2 n HCL-dal megsavanyítjuk és 2—3 percig állni hagyjuk. Utána 1 ml ammóniumszulfamát oldatot adunk hozzá, és 1 ml N-(1—naftil—etilén—diamin) HCL oldatot. Az oldatokat HITACHI 124-es spektrofotométeren fotometráljuk. Minden mérési sorhoz kalibrációs sort készítünk а 20 és 100 pM tartományban Eredmények Beállítottuk a nitrát (N03) és a nitrit (N02) meghatározásának módszereit, ezekkel összesen 320 meghatározást végeztünk el. Nem sikerült minden mintából elvégezni a méréseket, ezért megadjuk az esetszámot, amely megmutatja, hogy az egyes eredményeket hány betegen sikerült megállapítani. Az I. típusú vizsgálatok eredménye 1. Az éhgyomri spontán kevert nyál nitrát koncentrációja átlagosan 4,21 ± + 0,88 mg/1 esetszám = n = 32, 2. A reggeli után egy órával nyert spontán kevert nyál nitrát koncentrációja átlag 4,92 +1,01 mg/1 n = 35. 3. Az ebéd után két órával nyert spontán kevert nyál nitrát koncentrációja átlag 8,44+1,82 mg/1 n = 35. A reggeli és délutáni nyálak nitrát koncentrációjának átlagai közti különbség szignifikáns a Student-féle egymintás ,,t” próba szerint p< 0,023. 163
