A Hét 1990/2 (35. évfolyam, 27-52. szám)
1990-08-31 / 35. szám
MIT OPERÁL A GÉNSEBÉSZ? Rejtvényfejtő barátom kéri tanácsomat. „Ilyen sebész is van" — szól a meghatározás, s három „kockába" kell beírni a megfelelő előtagot. Has-, bőr-, agy-, kéz- sebész? Közös próbálkozásunk eredményeként végre megszületik a helyes válasz: gén — sebész. No jó, de mit operál a génsebész? — akadékoskodik barátom. Megpróbálok válaszolni. EGY KIS ETIMOLÓGIA Mindenekelőtt szögezzük le: a génsebész nem szikével, s nem a műtőben dolgozik. Tulajdonképpen nem is sebész, kirurgus, a szó eredeti értelmében (cheir görögül kezet jelent, s cheirurgia pedig kézzel végzett munkát). Igaz ugyan, hogy munkája során sor kerül a „vágásra" s újra összeillesztésre is. ám ezek a műveletek vegyi, pontosabban biokémiai úton mennek végbe. Az angolszász irodalom nem is használja a génsebészet kifejezést, helyette a módszer lényegére jobban rátapintó „genetic engineering"-rö\, azaz genetikai mérnöki tevékenységről beszél. Nem honosodott meg a genetikai manipuláció kifejezés sem, éppen a manipuláció szó nem éppen bizalmat gerjesztő csengése miatt. Szakszövegekben találkozhatunk a DNS-Á/onozás elnevezéssel is, mely a művelet végtermékére utal. A klónozás eredetileg egyetlen egyednek olyan szaporítását jelentette, melynek során a keletkező utódoknak nem változik a genetikai állománya, azaz azonos öröklési információt tartalmazó egyedek jönnek létre. (Klónozás például a növények ivartalan szaporítása.) Az igy létrejött, genetikailag egységes utódok összessége a klón. Nem tévesztendő össze a hasonló csengésű s jelentésű klán szóval, mely a vérrokonságon alapuló nemzetséget jelenti. Jobb híján maradjunk tehát a génsebészet elnevezésnél s próbáljuk meghatározni e fogalom tartalmát. A génsebészet olyan biokémiai-genetikai-mikrobiológiai művelet, melynek során egy élő sejt génállományába idegen géneket juttatunk be, melyek a gazdasejtben fennmaradnak s a sejttel együtt tovább szaporodnak. Nos ebből a definícióból — mondhatná barátom — még mindig nem derül ki mit, s főleg hogyan operál a génsebész. Kezdjük tehát szép sorjában! ... BIOKÉMIAI MŰVELET ... Először is tisztázzuk mit nevezünk génállománynak, genomnak. A genom a gének öszszessége, a sejt összes DNS-e. A gén ugyanis nem más, mint a genetikai információt hordozó dezoxiribonukleinsav (DNS) molekulájának egy szakasza, amely egy bizonyos tulajdonság megjelenését teszi lehetővé az utódban. Századunk egyik legnagyobb biológiai felfedezése volt az a felismerés, hogy az örökletes információ hordozója a DNS vegyi szerkezete. A DNS molekulája egy nagyon hosszú, spirál vonalban egymásra tekeredő kettős fonál — mint a csigalépcső két korlátja. A „lépcsőket" az egymással szemközt elhelyezkedő nukleotidok alkotják, mégpedig bizonyos meghatározott rend szerint: a nukleotidok fö alkotórészét képező négyféle bázis közül az adeninhoz (A) csak timin (T), a guaninhoz (G) csak citozin (C) párosulhat. Három egymás „alatt" elhelyezkedő lépcsőfok (például C,G,T) határoz meg, kódol egy aminosavat. Az egymás után meghatározott sorrendben kővetkező bázishármasok (tripletek) tehát megszabják a fehérjék építőköveinek, az aminosavaknak sorrendjét (szekvenciáját). Az „élet csigalépcsőjében", a DNS- ben ily módon tárolt információ íródik át a ribonukleinsavra (RNS), mely tulajdonképpen a DNS édestestvére. Abban különbözik a DNS-töl, hogy egyrészt timin helyett uracüt (U) tartalmaz, másrészt pedig „mozgékonyabb" : elhagyhatja a sejtmagot s a DNS-ről lemásolt információt eljuttatja a fehérjék „gyáraiba", a riboszómákhoz. E biokémiai történések megismerése elengedhetetlen feltétele volt a génsebészet megszületésének, mint ahogy feltétele a további, genetikai szakasz megértésének is. A fentebb ismertetett, s „párosodási specificifas"-nak elnevezett törvényszerűség ugyanis azt is jelenti, hogy egy adott DNS-szakasz (a csigalépcső egyik széle) képes kötődni a kiegészítő nukleotidsorrendet tartalmazó DNS darabhoz. ... GENETIKAI MŰVELET ... Eljutottunk tehát az alapkérdés megválaszolásához: mit s hogyan vág a génsebész. A válasz a kérdés első felére egyszerűbb: géneket, azaz DNS-szakaszokat. A hogyan bővebb magyarázatra szorul. Mint már jeleztük, a vágás s összeillesztés biokémiai úton történik, mégpedig enzimek segítségével. Enzimek? Tamáskodik biológiában is jártas barátom. Hiszen az enzimek biokémiai folyamatok sebességét növelő biokatalizátorok! Nos, ismét egy kis turpisság van az elnevezés körül. A génsebészetben használt „enzimek" valóban nem katalizátorok — mint ahogy a génsebészek sem sebészek. A szakemberek által restrikciós endonukleázoknak elnevezett enzimek olyan fehérjék, melyek a kétfopalas DNS-en egy 4—6 bázisból álló szakaszt felismernek, s e szakaszok végén hasítják, ha úgy tetszik vágják a DNS-t. A restrikciós endonukleázok igy, annak megfelelően, hogy az adott DNS-ben hányszor fordul elő az endonukleáz számára „ismerős" szakasz, több kisebb méretű részre „szeletelik" az eredeti DNS-molekulát, más szóval korlátozzák annak hosszát (innen a restrikciós — korlátozó jelző). A vágáson tehát túl lennénk. Az igazi sebész azonban nemcsak vágni, hanem újra összevarrni, összeállítani is tud. Az újraegyesítés lehetséges a génsebészetben is, mégpedig annak köszönhetően, hogy az endonukleáz segítségével nyert DNS-szeletek végei „ragadósak". Magyarán: az ún. párosodási szabály értelmében a DNS-szál fél lépcsőfokai az őket kiegészítő másik szál fél lépcsőfokaival újra egy kétszálú DNS molekulává „ragaszthatok" össze. A génsebészet gyakorlati megvalósítása felé vezető úton akkor történt óriáslépés, amikor a kutatók felismerték, hogy a különböző forrásból származó DNS-eket az egy s ugyanaz a hasító enzim úgy szeleteli fel, hogy azok végei kölcsönösen ragadósak. így a két különböző egyedből származó DNS-szeletek újra egyesülhetnek, szaknyelven: rekombinálódhatnak. Az összekapcsolódás végbemehet a DNS-szelet mindkét végén is, azaz „beültethető” egy előzőleg ketté hasított ún. gyűrűs DNS-be. ... MIKROBIOLÓGIAI MŰVELET ... A „sebészi" feladatok (vágás, összekapcsolás) mikéntje tisztázódott. Hátra van még annak magyarázata hogyan juttathatjuk be a fenti módon előállított rekombinált vagy hibrid DNS-X az élő sejtbe. Ha ugyanis azt szeretnénk, hogy rekombinált DNS-ünk genetikai információja megvalósuljon, ehhez RNS-re, riboszómákra s természetesen aminosavakra van szükség. Ez utóbbi három pedig csak az élő sejtben fordul elő megfelelő mennyiségben s minőségben. A kérdés megoldásában a mikrobiológusok, tehát a legkisebb, csak mikroszkóppal látható élőlényekkel foglalkozó tudomány képviselői Siettek a biokémikusok és genetikusok segítségére. Régi felismerése a mikrobiológiának, hogy a vírusok — ezek a baktériumszürőn is áthatoló, DNS vagy RNS tartalmú, egymilliomod mm nagyságrendű „élőlények" — nemcsak az állatok, s növények sejtjeibe, hanem a baktériumok sejtmag nélküli sejtjeibe is behatolnak. A baktériumok vírusait bakteriofágoknak nevezzük. A génsebészet hőskorában — az 1970-es évek vége felé — a sejtbe bejuttatni kívánt DNS-szeletet előbb, a fent említett módszerrel beültették a bakteriofág DNS-ébe, majd lehetővé tették, hogy a bakteriofág végezze „szokványos" munkáját: azaz hatoljon be (fertőzze meg) a baktériumsejtet. Ha ez sikerült, a baktériumsejtbe bekerült hibrid-DNS nemcsak az újabb bakteriofágok termeléséhez ad utasítást, hanem a beültetett DNS-szelet által kódolt fehérje előállításához is. A későbbiek során a bakteriofágok trójai faló szerepét az ún. plazmidok vették át. A platmidok olyan nem kromoszómához, sejtmaghoz kötött, a sejtplazmában — innen a nevük — szabadon létező gyűrűs DNS-szakaszok, melyek a bakteriofágokhoz hasonlóan, szintén képesek önállóan szaporodni, illetve bármely sejt belsejébe behatolni. Érthető? Nagyjából igen — bólogat rejtvényfejtő barátom, s lévén a jogtudományban is járatos, egy kérdéssel vág vissza: Cui prodest? Azaz: kinek használ, mire jó a génsebészet? S nem lehet-e abból baj, hogy gazdasejtként baktériumokat használnak fel. Hiszen közismert, hogy a baktériumok több súlyos betegség, járványok okozói is lehetnek. A fogas, ám jogos kérdésekre a legközelebb válaszolunk. Dr. KISS LÁSZLÓ Életveszélyes automaták A szokatlan balesetek egy eddig még senki által nem tanulmányozott körére mutatott rá egy amerikai orvos őrnagy, Michael Q. Cosia nem kisebb szakmai lapban, mint a JAMA-ban, az amerikai orvosszövetség folyóiratában közölt cikkében. Arról számol be, hogy komoly veszélyek elé néznek azok, akik dühüket üdítőital-automatákon akarják levezetni. Az általa vizsgált esetek közül három végződött halállal, a kévésbé súlyosak pedig a bokaficamtól a lábujjrepedésen, a sipcsonttörésen át egészen a veserepedésig, sőt koponyatörésig terjedtek. Ha ugyanis az automata elnyeli a pénzt és nem ad érte semmit, gyakorta előfordul, hogy a feldühödött vásárló belevág az öklével, esetleg belerúg, rosszabb esetben pedig megbillegteti a gépet, hogy megkapja, ami jár neki. Ez utóbbi az életveszélyes: egy ilyen automata, ha tele van, akár fél tonnát is nyomhat, s ha felborul, az szörnyű következményekkel járhat ... 16