196457. lajstromszámú szabadalom • Eljárás interferonok előállítására

(19) HU MAGYAR

NÉPKÖZTÁRSASÁG

SZABADALMI

LEÍRÁS

B

(11)

196457

Bejelentés napja: (22) 1981.06.29. (21) (1882/81)

Nemzetközi

osztályozás:

(51) NSZCN

Elsőbbsége: (33) US: (32) 1980.07.01.

C 12 N 15/00

1980.09.08. 1980.11.10. 1081.04.21. (31) (164, 986), (184, 909), (205, 578),

C 12 P 21/00

ORSZÁGOS

(256, 204)

TALÁLMÁNYI

Közzététel napja: (41) (42) 1983.10.28.

f Szabadalmi Tár. J

HIVATAL

'sÍ^JOLAJD0t''.A^

Megjelent: (45) 1989.05.25.

Feltalálók: (72)

Goeddel David Van Norman, Burlingame, Kalifornia, Pestka Sidney, North Caldwell,

New Jersey, US

Szabadalmas: (73)

F. Hoffmann-La Roche et CO. AG., Bázel, CH, GENENTECH, Inc., South San Francisco, Kalifornia, US

(54) ELJÁRÁ S INTERFERONOK ELŐÁLLÍTÁSÁRA

1

(57) KIVONAT

A találmány tárgya eljárás a LelF A 1- 166 aminosav-szekvenciéját tartalmazó érett LelF A polipeptidet kifejezni képes LelF A trp típusú plazmidok előállítására, amelynek során indukált emberi fehérvérsejt mRNS-böl vagy sejtvonal mRNS-ból előnyösen a KG-1 sejtvonal (ATCC CRL 8031) niRNS-éből származó cDNS-t tartalmazó baktériumtelep-bankokat állítanak elő, az interferon-aktivitás kiváltására képesnek mutatkozó telepekből a plazmid DNS-eket elkülönítik és ezeket szintetikus DNS vizsgáló mintáknak egy indukált mRNS-ból származó cDNS -sei történő hibridizálása és a hibridizált szintetikus DNS vizsgáló minták reverz transzkripcióval történő hosszabbítása útján kapott, rádióaktiv jelzésű cDNS vizsgáló mintákhoz hibridizálják, a legerősebben hibridizáló és a teljes lánchosszúságú LelF A gént tartalmazó kiónokat kiválasztják, az említett hibridizáló kiónok teljes LelF A génjét szintetikus dezoxioligonukleotidok alkalmazásával

módosítják az érett LelF A mikrobiális kifejezését esetleg gátló vezető szekvenciák kiküszöbölése végett, és a kapott terméket egy trp promotort, operátort és trp vezető riboszóma kötési helyet tartalmazó plazmidba iktatják oly módon, hogy a módosított LelF A gén operatíven kapcsolódjék az említett trp szabályozó rendszerrel.

196457