182276. lajstromszámú szabadalom • Eljárás makromolekulárissá alakított adenin-származékok előállítására

(19) HU MAGYAR

NÉPKÖZTÁRSASÁG

SZABADALMI

LEÍRÁS

(11)

182276

émtk

Bejelentés napja: (22) 1976. VII. 14. (21) (126/81)

Nemzetközi osztályozás:

(5l) NSZO3

C 07 H 19/16;

Elsőbbsége: (32) 1976. V. 4. (31) (22 958 A/76)

C 07 D 473/34

ORSZÁGOS

(33) Olaszország

Közzététel napja: (41) (42) 1983. III. 28.

TALÁLMÁNYI

í Szabadalmi Tír. y

HIVATAL

Megjelent: (45) 1986. VIII. 31.

^--^JOLAJDOMa

Feltalálók:

(72) Zapelli Piergiorgio vegyész, Monterotondó, Rossodivita Antonio vegyész, Monterotondó, Pappa Rosario vegyész, Monterotondó,

Re Luciano vegyész, Róma,

Olaszország

Szabadalmas:

(73) ANIC S. p. A.,

Palermo

Olaszország

(54) Eljárás makromolekulárissá alakított adenin-származékok

előállítására

1 2

A találmány tárgya eljárás új, makromolekulárissá alakított adenin-származékok előállítására.

E vegyületek az I általános képletnek felelnek meg — ahol

n 0 és 3 közötti egész szám,

B valamely ismert adenin-származékból levezethető csoport, és ahol a CO-csoporthoz kapcsolódó nitrogénatom valamely 10 000—100000 molekulasúlyú polietilénimin, polilizin vagy aminohexil-szefaróz része —.

Az említett ismert adenin-származék például nikotinsav- 10 amid-adenin-dinukleotid (NAD), nikotinsavamid-adenin-dinukleotid-foszfát (NADP), adenozin-monofoszfát (AMP), gyűrűs adenozin-monofoszfát, adenozin-difoszfát (ADP), adenozin-trifoszfát (ATP), adenozin vagy adenin.

E vegyületeket úgy állíthatjuk elő, hogy egy II általános 15 képletű—ahol az n és a B általános képletű csoport jelentése a fent megadott — a 8-as helyzetben egy co-karboxil-csoportot viselő oldalláncot tartalmazó adenin-származékot 10 000—

100 000 molekulasúlyú polietiléniminnel, polilizinnel vagy aminohexil-szefarózzal reagáltatunk.

A II általános képletű kiindulási anyagok előállítását a 177 290. számú magyar szabadalmi leírás ismerteti.

Kívánt esetben a reakciót valamely vízoldható (például N-etíI-N'-(3-dímetíI-amíno-propíl)-karbodiímid-hidroklorid), vagy vízben nem oldható (például diciklohexil-karbodiimid) karbodiimid mint kondenzálószer jelenlétében végezzük.

A szubsztituált adenin-származékok karboxilcsoportja és a makromolekuláris vegyületek aminocsoportja között végbemenő, és az amidkötés kialakulásához vezető reakcióját

vizes közegben, vagy víz és valamely vízzel elegyedő szerves oldószer (például pirídin, tetrahidro-furán, dioxán stb.) elegyében, + 5 C° és + 50 C° közötti hőmérsékleten, előnyösen szobahőmérsékleten végezzük.

5 A találmány szerinti, makromolekulárisan alakított adeninszármazékokat számos módon felhasználhatjuk.

Például a nikotinsavamid-adenin-dinukleotid (NAD) makromolekulárissá alakított származékait, de ugyanígy a többi, makromolekulárissá alakított származékot is, affinitás-kromatográfia céljaira, vagy aktív, nem diffundáló koenzimként használhatjuk.

így például vízoldható makromolekulákhoz kapcsolva nem diffundáló, vízoldható, makromolekulárissá alakított koenzimként használhatjuk őket. így kiszélesíthetjük azon ismert enzimrendszerek alkalmazási területét, amelyekben az enzim oldhatatlan, porózus, makromolekulák számára átjárhatatlan vázanyagokba, például rostos anyagokba, po- 20 liakrilamid-gélbe, mikrokapszulákba stb. fizikailag beágyazva van jelen. A fizikai beágyazás révén az enzim- vagy a polienzimrendszer és a vízoldható, makromolekulárissá alakított koenzim, tehát az enzim és a koenzim valójában szoros érintkezésben marad, ezáltal meg tudjuk akadályozni, 25 hogy a koenzim kiszivárogjon a zárt rendszerből, amit a természetes koenzimekkel — azok kis molekulasúlya miatt — nem tudunk megtenni.

Ha vízben oldhatatlan makromolekulákhoz kapcsoljuk e 30 származékokat, akkor affinitás-kromatográfia vagy hetero-182276

1