180566. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L-tronin előállítására mikrobiológiai úton
f MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI 180566 LEÍRÁS Nemzetközi osztály jelzet : NSZOs C 07 C 101/30, C 12 P 13/08. C 12 R 1/19 Bejelentés napja: 1980. III. 13. (597/80) Bejelentés elsőbbsége: 1979. VII. 13. (2781356) Szovjetunió. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1982. VII. 28. Megjelent: 1984. IV. 30. f . Szabadalmi Tár V"'---Szabadalmas: Sóim Albert Fedorovics vegyész, Antipov Viktor Pavlovics mérnök, Pozdnyakova Tamara Mihajiovna vegyész, Debarov Vlagyimir Gregorjevics vegyész, Zsdanova Nelli Iszakovna tanár, Szokolov Alekszander Konsztantinovics fizikus, Livsics Vitalij Arkagyevics orvos, Kozlov Junij Ivanovics mérnök, Kurgez Jevgenyij Majzevics biokémikus, Jankovszkij Nyikoláj Kazimiroviçs fiziológus, Guzjatyiner Mihail Markovics biológus, Moszkva, Szovjetunió. Feltalálók : Vszeszojuznij Nauosno Iszledovátyelszkij Insztitut Genetiki i Szelekcii Promislennih Mikroorganizmov (Vnii Genetika) Eljárás L-treonin előállítására mikrobiológiai úton 1 A találmány tárgya, eljárás L-treonin előállítására mikrobiológiai úton. Az L-treonin az eszszenciális aminosavak közé tartozik, és gyógyászati célokra különböző tápanyagkeverékekben széleskörűen alkalmazzák. Az L-treonin továbbá emberi és állati élelmezésre szolgáló termékek adalékaként, valamint a farmakológiai és kémiai iparban reagensként alkalmazható. Az L-treonin előállítására különböző mikrobiológiai eljárások ismeretesek, amelyek során például a Brevibacterium flavum, Escherichia coli, Corinebacte'rium acetoacidophilum, Proteus rettgeri, Serratia marcescens, Aerobacter aerogenes, Corynebacterium glutamicum termelő törzseket süllyesztett kultúrában, szénforrásként glukózt, fruktózt, ecetsavat, etanolt, továbbá vitaminokat, aminosavakat, nitrogénforrást és a szükséges ásványi sókat tartalmazó tápközegben tenyésztik (1 223 470., 1 260 995., 1 286 208. ' sz. brit szabadalmi leírások, 1 573 433, 1 580 549., 1 579 835., 1 603 855. sz. francia szabadalmi leírások, 2 044 907. sz. NSZK-beli szabadalmi leírás). A legnagyobb L-treonin hozamot a Brevibacterium flavum mutált törzseivel érték el: glu" kóz-tartalmú közegben 18 g/1 (Agr. Bioi. chem. 1973, 37, 653), ecetsav-tartalmú közegben 40 g/1 (1 260 995. sz. brit szabadalmi leírás). Mindegyik esetben az a-amino-^-oxivaleriánsavval szemben ellenálló mutánsokat alkalmazták. Egy további ismert eljárás szerint az Escheri-2 ehia coli mutált törzseit szénhidrátokat, nitrogénforrásokat, ásványi savakat, tiszta aminosavakat vagy azokat tartalmazó fehérje-hidrolizátumokat tartalmazó tápközegben, süllyesztett 5 kultúrában tenyésztik. 96 órás fermentálás után az L-treonin legmagasabb hozama 10,4 g/1 volt (1 223 470. sz. brit szabadalmi leírás, 3 711 375. sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás, 1 551 414. és 1 580 545. sz. francia szaba- 10 dalmi leírás). Az eljárásokban alkalmazott mutánstörzsekre jellemző az izoleucin vagy izoleudn és metionin (1 223 470. sz. brit szabadalmi leírás), vagy diamino-pimelinsav (3 711 375. sz. amerikai egyelő sült államokbeli szabadalmi leírás és 1 551 414. sz. francia szabadalmi leírás) szükségletük. Az eljárások közös hátránya, hogy (főleg szénhidrát-tartalmú közegben) az L-treonin csak kismértékben dúsul fel, továbbá hát- 20 rányos a hosszú fermentálási idő (96—120 óra). Szén- és nitrogénforrást és ásványi sókat tartalmazó közegben süllyesztett kultúrában tenyésztett L-treonin-termelő törzsként továbbá az Escherichia coli poliauxotróf mutánsait is 25 alkalmazzák, például az E. coli ATCC 21 272, E. coli ATCC 21148, E. coli ATCC 21149 törzseket. Szénforrásként glukózt és fruktózt használnak. Az említett törzsek növekedéséhez diamino-pimelinsav, izoleucin, metionin szükséges. Így pél- 30 dául az E. coli ATCC 21272 törzsnek diamino-180 566 1
