177915. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L-lizin előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 177915 Bejelentés napja: 1977. VI. 29. (VE—844) Nemzetközi osztályozás : C 12 D 13/06 ORSZÁGOS Elsőbbsége: 1976. VI. 30. (2 378 392) Szovjetunió Közzététel napja: 1981. VI. 27. TALÁLMÁNYI HIVATAL Megjelent: 1983. XI. 30. Feltalálók : Zsdanova Nelli Iszakovna tanár, Moszkva, Vikanszkij Jurij Davidovics agronómus, Moszkva, Udrovszkij Guntisz Avgusztovics tanár, Livany, Skagale Ligyia Boleszlavnovna mérnök, Livany, Dalka Renata Broniszlavovna tanár, Livany, Szovjetunió Szabadalmas : Vszeszojuznij Naucsno- Iszledovátyelszkij Insztyitut Genetyiki i Szelekciji Promüslenyih Mikroorganyizmov, Moszkva, Szovjetunió Eljárás L-lizin 1 1 A találmány tárgya új eljárás L-lizin előállítására mikrobiológiai úton. Miként ismert, az L-lizin az eszszenciális aminosavak egyike, amely igen fontos szerepet tölt be az emberi és állati szervezetek működésében. Az L-lizint a mezőgazdaságban széles körben alkalmaz- 5 zák a takarmány aminosav-összetételének módosítására. Az L-lizint egy ismert mikrobiológiai módszer szerint úgy állítják elő, hogy szén- és nitrogénforrást, ásványi sókat és növekedésserkentő adalékanyagokat tartalmazó 10 fermentációs közegben Brevibacterium sp. 22L vagy Brevibacterium sp. 22 törzset tenyésztenek, majd a végterrriéket elkülönítik (240 644, ill. 171 727 sz. szovjet szerzői tanúsítvány). Az ismert eljárás hátránya az, hogy termelő törzsként 15 0B-fágokra nagymértékben érzékeny törzseket igényel. 0B-fágok hatására a Brevibacterium sp. 22L és a Brevibacterium sp. 22 törzs egyaránt fagolízist szenved, ami teljes mértékben megakadályozza a termelő tenyészet növekedését és az L-lizin feldúsulását a tenyészet- 20 ben. A találmány értelmében az ismert módszer e hátrányát kívánjuk kiküszöbölni. A találmány szerint olyan hatékony és stabilan kézbentartható eljárást kívánunk kidolgozni L-lizin elő- 25 állítására, amelynek során termelő törzsként egy fágokkal szemben ellenálló mikroorganizmus-törzset alkalmazunk. A találmány tárgya tehát eljárás L-lizin előállítására egy Brevibacterium sp. mikroorganizmus-törzsnek asz- 30 előállítására 2 szimilálható szén- és nitrogénforrást, ásványi sókat és növekedésserkentő adalékokat tartalmazó fermentációs közegben levegőztetés és keverés közben végzett tenyésztése és a végtermék elkülönítése útján. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy termelő törzsként a Brevibacterium sp. 22L törzsből többlépéses mutagén szelekciós eljárással kialakított Brevibacterium sp. DE—84 törzset használjuk fel. A többlépéses mutagén szelekciós eljárás egyik lépésében szelekciós alapismérvként a törzs fágokkal szemben mutatott ellenállóképességét használjuk fel, amit lenyomatképzési módszerrel, fágokkal történő érintkeztetés nélkül vizsgálunk. A találmány szerinti eljárással az L-lizint a következőképpen állítjuk elő: Hús-pepton-agar ferde tenyészeten 1 napig tenyésztett Brevibacterium sp. DE—84 törzset főkomponensként melaszt és kukoricalekvárt tartalmazó, steril táptalajba helyezünk, és 24 órán át 28—30 C°-on, állandó keverés közben tenyésztjük. Az így kapott oltóanyagot főkomponensként a törzs számára asszimilálható szénforrásokat (szacharózt, glükózt, melaszt, ecetsavat és hasonlókat), továbbá a törzs növekedése szempontjából nélkülözhetetlen anyagokat, így kukoricalekvárt vagy élesztő-biomassza-hidrolizátumot, ásványi anyagokban kötött nitrogént és ásványi sókat tartalmazó, steril fermentációs közeghez adjuk, A fermentációs közeghez 10 térfogat% oltóanyagot adunk. A fermentációt 72 órán át 28—30 C°-on, erélyes keverés közben végezzük. A fermentációs lépés lezajlása után a fennentlében feldúsult L-lizint ismert módon, kristályos formában 177915
