177805. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nem kötörr hormonok vagy gyógyszerek meghatározására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 177805 JÍ|| Bejelentés napja: 1978. IV. 27. (CA—423) Nemzetközi osztályozás : ip p Elsőbbsége: 1977. VII. 8. (P27 31 028.7) Német Szövetségi Köztársaság G 01 N 33/16 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1981. VI. 27. Megjelent: 1983.X. 31. Feltaláló: Szabadalmas: Dr. Thoma Hans A., oki. vegyész, München, Chandon Investment Planning Ltd., Német Szövetségi Köztársaság Grand Cayman, Cayman Island Eljárás nem kötött hormonok vagy gyógyszerek meghatározására 1 A találmány tárgya eljárás nem kötött hormonok és gyógyszerek meghatározására. A szteroidok az emberi szérumban fehérjéhez kötött állapotban vannak. A klinikai-kémiai hormon-analitikában a hormon-meghatározások majdnem kizárólag 5 azon az elven alapulnak, hogy a transzportfehérjék és a hormonok közötti kötést felbontják és a hormonok teljes mennyiségét meghatározzák. A kötés felbontását a legkülönbözőbb módszerekkel, mint például oldószeres extrakció, hődenaturáció, enzimatikus hidrolízis és 10 savas- vagy lúgos kezelés, végzik. A kötőfehérjék mennyisége az emberi szérumban azonban nem mindig azonos. Ismeretes, hogy a fogamzásgátlószert fogyasztó vagy a terhesség utolsó szakaszában levő nők szérumában például a kortizol-kötő, 15 illetve tiroxin-kötő globulinok mennyisége erősen megnő. Emellett a kötőfehérjék mennyiségének megnövekedése vagy csökkenése izoláltan is előfordulhat, amelynek familiáris előfordulása és öröklődése ismeretes. A kötőfehérjék szintjének ilyen jellegű változása a 20 hormonok teljes mennyiségének meghatározásánál olyan értékeket eredményez, amelyek valamilyen szindrómára utalnak, viszont a betegnél a szindrómának megfelelő klinikai tünetek nem jelentkeznek. Nyilvánvalóan a fehérjéhez kötött hormonok biológiailag inaktívak, csak a 25 fehérjéhez nem kötött hormonok hatásosak. A fehérjéhez kötött és szabad hormonok meghatározására alkalmas, ismert módszerek vagy olyanok, hogy a szétválasztás során a kötött és szabad hormonok között az egyensúly megmarad, mint például a klasszikus 30 2 dialízisnél és az ultraszűrésnél, vagy olyanok, hogy a szétválasztás során ezt az egyensúlyt nem tartják fenn, mint poldául az oszlopkromatográfiánál vagy az adszorpciós módszernél, amelyek viszont a szabad hormon tényleges mennyiségét adják meg. Ezeknél a módszereknél a reakcióidő igen lényeges faktor, mert az adszorbens és a szteroid között a kötés irreverzíbilis. Az ismert elválasztási módszerek igen költségesek és a szabad hormonoknak csak a százalékos részarányát adják meg. Az abszolút mennyiség csak a hormon teljes mennyiségének ismeretében számítható. A mérés emiatt a közvetített meghatározás miatt bizonyos pontatlanságot hordoz magában, nem beszélve a különösen költséges módszerről, amely a százalékos arány meghatározásához szükséges. A találmány célja olyan eljárás kidolgozása a nem kötött hormonok és gyógyszerek mennyiségének meghatározására, amely a szabad hormonoknak vagy gyógyszereknek nem csak a százalékos arányát, hanem a teljes mennyiségét adja meg és amely egyszerű és automatizálható. A találmány tárgya eljárás nem kötött hormonok és gyógyszerek meghatározására a hormonoknak vagy gyógyszereknek antitestekkel történő reakcióját követő radioimmunológiai kiértékeléssel, azzal jellemezve, hogy a nem kötött hormonokat, kötőfehérjikhez kötött hormonokat és kötőfehérjéket tartalmazó oldatot immobilizált antitesttel hozzuk össze és a nem kötött hormonokat hagyjuk az antitesttel reagálni. Ezután a kötőfehérjéhez kötött hormonokat és kötőfehérjiket jel-177805
