177561. lajstromszámú szabadalom • Eljárás poliamidhoz kötött, biológiailag aktív protein előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 177561 Bejelentés napja : 1978. II. 23. (BO—1700) Nemzetközi osztályozás : C 07 G 7 02 ORSZÁGOS Elsőbbsége: 1977. II. 24. (P 27 08 018.8 sz.) Német Szövetségi Köztársaság Közzététel napja: 1981. V. 28. TALÁLMÁNYI HIVATAL Megjelent: 1983. III. 31.Feltalálók : dr. Horn Jurgen vegyész, Langen, dr. Albert Winfried immunológus, Paehl, dr. Batz Hans-Georg vegyész, Tutzing, dr. Nelböck-Hochstetter Michael vegyész, Tutzing, Német Szövetségi Köztársaság Szabadalmas: Boehringer Mannheim GmbH, Mannheim-Waldhof, Német Szövetségi Köztársaság Eljárás poliamidhoz kötött, biológiailag aktív protein előállítására A találmány tárgya eljárás biológiailag aktív proteinnek poliamidon vagy ismert szilárd hordozóra felvitt poliamidon történő rögzitésére; az eljárás azzal tűnik ki, hogy a hordozó semleges és töltés nélküli. Az utóbbi években a biológiailag aktív proteinek, mint enzimek, hormonok rögzítése, ill. megkötése antigén-antitest reakciókra és haptén-antitest reakciókra alkalmas anyagokhoz, koaguláló szerekhez és hasonló anyagokhoz, különösen a preparatív és analitikai kémiában nagy jelentőségű lett. Eddig is számos rögzítési eljárást dolgoztak ki. Ennek ellenére egyre újabb rögzítési problémák merülnek fel, amelyek az eddig ismert eljárásokkal nem oldhatók meg. Erre vezethető vissza, hogy a biológiailag aktív proteinek hordozóanyagokon történő rögzítésének minden további nélkül belátható előnyei ellenére a megkötött (fixált) proteinek gyakorlati bevezetése késlekedik, és a várt, széles áttörés nem realizálódott e területen. Immobilizált aktív proteinek hordozóanyagaiként érdekes fizikai és kémiai tulajdonságaik miatt a poliamidok különös jelentőségűek. A poliamidok szekunder aminocsoport-tartalmuk miatt a proteinszerkezettel bizonyos kémiai hasonlóságot mutatnak, különösen töltéseloszlásuk tekintetében, ily módon, ha egyéb — a proteinek aktivitását hátrányosan befolyásoló — csoportok nincsenek jelen bennük, akkor a poliamidok egyéb hordozóanyagokhoz képest a rajtuk immobilizált enzimek biológiai aktivitását csak kevéssé befolyásolják negatív értelemben. Poliamidon mint hordozóanyagon kötött, biológiailag áktív proteinek már ismeretesek. Ezeknél a protein amidino-szerkezeten keresztül kötődik a poliamidra (lásd például Kollowik - Kaplan: „Methods in Enzymology". 25. köt., 646—648. old.). Analóg módon poliamidokat már poliiminoészterré átalakított alakban is kapcsoltak biológiailag aktív proteinekkel. 5 Ezeknél a poliamidon immobilizált biológiailag aktív proteineknél azonban a poliamidok mint enzimhordozók alapvető előnyös tulajdonságai nem tudnak teljes mértékben érvényesülni, mert ezúton pozitív töltésű csoportok képződnek, amelyek az enzim-kötésre hátrányosan hat- 10 nak. A találmány feladata ezért olyan, poliamidon kötött immobilizált enzimek létrehozása volt. amelyeknél a kötés (rögzítés) oly módon következik be. hogy a hordozóanyag semleges és töltés nélküli marad. A feladatot a találmány szerint biológiailag aktív prote- 15 innék vagy protein-szubsztrátum poliamidon vagy ismert szilárd hordozóra felvitt poliamidon történő rögzitésére szolgáló olyan eljárással oldjuk meg, amelyet az jellemez, hogy a poliamidot. valamely poliamid-oldószer jelenlétében, ekvimoláris mennyiségű formaldehiddel és egy aro- 20 másaminnal, triazinnal. karbamiddal, fenollal, vagy zselatinnal 0 és 100 C közötti hőmérsékleten reagáltatunk olyan poiiamid-származék képzése közben, amely a láncban CO N 25 CH R általános képletű lánctagokat tartalmaz, ahol R jelentése aromás aminból, triazinból, karbamidból, fenolból vagy zselatinból származó csoport, és ezt 30 a poliamid-származékot egy ismert bi- vagy poüfonkdós 177561
