176482. lajstromszámú szabadalom • Eljárás proteinek rögzítésére hordozóanyagokon
MAGYAR SZABADALMI 176482 NÉPKÖZTÁRSASÁG LEÍRÁS Nemzetközi osztályozás: w Bejelentés napja: 1977. I. 28. (BO—1651) Elsőbbsége : Német Szövetségi Köztársaság : 1976.1.29. (P 2603 319.2) C 07 G 7/00 C 07 G 7/02 msw ÄtyJ'v ORSZÁGOS Közzététel napja : 1980. IX. 27. I „ Iiw*t ' 1 # i TALÁLMÁNYI HIVATAL Megjelent: 1981. IX. 30. 1 il 1 3 • - « 1 * Feltalálók: dr. Horn Jürgen vegyész, Tutzing-Garatshausen, dr. Batz Hans-Georg vegyész, Tutzing, dr. Jaworek Dieter vegyész, Weilheim, Német Szövetségi Köztársaság Szabadalmas : Boehringer Mannheim GmbH., Mannheim-Waldhof, München, Német Szövetségi Köztársaság Eljárás proteinek rögzítésére hordozóanyagokon 1 A találmány tárgya eljárás proteinek — különösen biológiailag aktív proteinek — rögzítésére folyékony vagy szilárd hordozóanyagokon. Az antigén-antitest és Hapten-antitest reakciókban résztvenni képes anyagok, koaguláló faktorok és hasonló, biológiailag aktív proteinek, mint enzimek, hormonok rögzítése, illetve helyhez kötése — különösen a preparatív és analitikai kémiában — az utóbbi években nagy, jelentőségűvé vált. Eddig számos rögzítési eljárást fejlesztettek ki. így például polimer hordozóhoz kötött biológiailag aktív fehétjék előállítását ismerteti a 169 972 sz. magyar szabadalmi leírás. A számos ismert megoldás ellenére azonban újabb és újabb olyan rögzítési problémák vetődnek fel, amelyek az eddig ismert módszerekkel megnyugtatóan nem oldhatók meg. Erre vezethető vissza az is, hogy dacára a biológiailag aktív vegyületek hordozóanyagokra történő rögzítése minden további nélkül belátható előnyeinek, a rögzített proteinek gyakorlati bevezetése sok területen nagyon késlekedik és a várt széleskörű alkalmazás még nem vált valóra. Ehhez járul, hogy a legtöbb rögzítési módszer csak meghatározott hordozóanyagokra használható, vagy a hordozóanyag előállításához a biológiailag aktív protein jelenlétében vizes oldatban végzett polimerizációra (protein-kopolimerizációra) van szükség, ami az alkalmas hordozóanyagok körét szintén nagy mértékben korlátozza. Különösen alkalmas hordozóanyagok lennének aktív proteinek rögzítésére az olyan anyagok, amelyek sze-2 kunder aminocsoportokat tartalmaznak. Ezek közé tartoznak egyfelől olyan polimerek, amelyek különösen előnyös mechanikai és kémiai tulajdonságokkal rendelkeznek, mint a poliamidok, poliuretánok és egyéb poli- 5 peptid-szerű szerkezettel rendelkező vegyületek, mint poliaminosavak és hasonlók. Az ilyen, szekunder aminocsoportokat tartalmazó anyagok bizonyos kémiai hasonlóságot mutatnak a protein szerkezettel, különösen a töltéselosztás tekintetében. Ennek az a következ- 10 ménye, hogy az ilyen vegyületekhez rögzített enzimek biológiai aktivitására nem hatnak negatív tényezők, feltéve, hogy nincsenek jelen e vegyületekben olyan egyéb csoportok, amelyek a proteinek aktivitására különösen hátrányos hatást gyakorolnak. 15 Ismeretes, hogy az imidoészterek — amelyek szekunder aminokból könnyen előállíthatok — a proteinek aminocsoportjaival specifikusan amidino-szerkezetek képződése közben reagálnak (lásd például Colowick- Kaplan „Methods in Enzymology” 25. köt. 646—648. 20 old.). Az is ismeretes, hogy a poliamidok erős alkilezőszerekkel a poliiminoészterekké alakíthatók (3 340 210 számú amerikai szabadalmi leírás). A protein-rögzítés szempontjából az ilyen iminoésztereknek egy jelentős hátránya, hogy oldószerekben oldhatók, vagy legalábbis 25 duzzadnak. Ez azzal jár, hogy e polimerek ragacsosak, és granulátum, fólia, tömlő vagy egyéb formatest alakjában való kezelésük nehézkes vagy éppenséggel lehetetlen. A találmány feladata olyan eljárás kidolgozása, amely 30 lehetővé teszi biológiailag aktív proteinek legalább két 176482
