176103. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nembramicin-komplex előállítására mikrobiológiai úton
SZABADALMI 176103 NÉPKÖZTÁRSASÁG LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Cp Bejelentés napja: 1978. V. 23. (GO—1404) Nemzetközi osztályozás: C 07 H 15/22 C 12 D 9/16 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1980. II. 28. Megjelent: 1981. VII. 31. /í^ V '■ * ‘ MWW ‘ , V ’■ • . .i Feltalálók : Szabadalmas : dr. Ott István biológus 21,0%, dr. Ambrus Gábor vegyészmérnök, 6,0%, Gyógyszerkutató Intézet, Budapest dr. Gyimesi József oki. vegyész, 5,5%, Harsányi Ilona biológus, 4,0%, dr. Bérdy János oki. vegyész, 3,5%, dr. Széli Valéria vegyészmérnök, 3,5%, dr.Balogh Tibor vegyészmérnök, 2,0%, Tölgyesi László vegyésztechnikus,2,0%, Kádár Istvánné vegyészmérnök, 1,5%, Nagy László oki. vegyész, 1,0%, Budapest, dr. Erdei János biológus, 10,0%, dr. Szűcs Endréné biológus, 10,0%, dr. Kaszab István biológus, 7,0%, Fábián Ferenc oki. vegyész, 5,0%, dr. Pólya Kálmán biológus, 5,0%, Kun Lajos vegyésztechnikus, 4,0%, Víg János üzemmérnök, 4,0%, Szilágyi Jenő fizikus, 3,0%, Nagy Csaba oki. vegyész, 2,0%, Debrecen Eljárás nebramicin-komplex előállítására mikrobiológiai úton 1 2 A találmány tárgya új eljárás nebramicin-komplex előállítására mikrobiológiai úton. Ismeretes, hogy a Streptomyces tenebrarius (ATCC 17 920) több komponensből álló, nemramicinnek elnevezett antibiotikum-keveréket szintetizál (Stark, 5 Hoehn és Knox, Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1967, 314. oldal; 1 178 489 számú nagy-britanniai és a 3 691 279 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás). Az antibiotikum-keverék minor komponensek mellett nebramicin-2 (apramicin), nebramicin-4 (6'-0-karbamoil-kanamicin B) és nebramicin-5' (6"-0-karbamoil-tobramicin) komponenseket tartalmaz [Koch, Davis és Rhoades, J. of Antibiotics, 26, 745 (1973)]. A 3 853 709 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban a szerzők kizárólag nebrami- 15 cin-2-t és nebramicin-7-et termelő mikroorganizmust írnak le. Japán szerzők a 4 032 404 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban Streptoalloteichus hindustanus törzs tenyésztésével oldják meg a nebramicin-2 és a nebramicin-5' előállítását. Az apramicin (nebramicin-2) előnyösen használható növényi és állati betegségek kezelésére (3 691 279, 3 853 709 és 3 876 767 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), a ő'-O-karbamoil-tobramicin (nebramicin-5') hidrolízisével előállított tobramicin (nebramicin-6) pedig szélesspektrumú, elsősorban polirezisztens Pseudomonas-ok okozta fertőzések leküzdésében jelentős szerepet játszó, a humán-terápiában használt antibiotikum (például Preston és Wick, Antimicrobial Agents and. Chemotherapy, 1970, 322. oldal). 30 Jelentős kutatómunkát igényel a fenti antibiotikumokat termelő mikroorganizmusok termelőképességének fokozása. A törzsnemesítéskor használt ismert módszerek, az UV-, közeli UV- és röntgen-besugárzások, valamint a mutagén anyagokkal végzett kezelések után igen nagyszámú túlélő sejt termelőképességét kell megvizsgálni a több antibiotikumot szintetizáló egyedek kiválasztására. így eljárva, hosszú időn át végzett törzsnemesítő munkával is rendszerint csak csekély mértékben lehet 10 egy mikroorganizmus termelőképességét növelni. Tapasztalataink szerint a Streptomyces tenebrarius termelőképességét az ismert módszerekkel jelentősen nem lehet fokozni. A szokásosan végzett szelekciós munkát igen megnehezíti, hogy a mikroorganizmus több komponensből álló antibiotikum-komplexet bioszintetizál, így az izolált egyedek vizsgálata során meg kell határozni a termelt komplex összetételét ahhoz, hogy ki lehessen választani a kívánt előnyös vegyületet túlsúlyban termelő törzseket. Ez rendkívül munkaigényes eljárás, és az 20 ismert mérési módszerek hibahatárait figyelembe véve szinte reménytelenné teszi a várható 2—5%-os termelőképesség-emelkedés kimutatását, így a jobban termelő törzsek izolálását. A találmány célja olyan új, gyors és könnyen ki- 25 vitelezhető fermentációs eljárás kidolgozása, amellyel az eddiginél nagyobb antibiotikum-koncentrációjú fermentlevek állíthatók elő. Kísérleteink során azt tapasztaltuk, hogy a nebramicin-komplexet termelő Streptomyces tenebrarius mikroorganizmus 2300 ftg/ml nebramicin-komplex, illetve 176103
