175045. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és berendezés sejttenyészet előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 175045 Nemzetközi osztályozás: Bejelentés napja. 1976. V. 21. (BE -1260; C 12 K 9/00, C 12 K 1/10 Nagy-britanniai elsőbbsége: 1975. V. 21. (21998/75) ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1979. XI. 28. Megjelent: 1980. XI. 29. Feltaláló: Szabadalmas: Burbidge Colin vegyészmérnök, Crawley, Sussex, Beecham Group Ltd., Brentiord, Nagy-Britannia Middlesex, Nagy-Britannia Eljárás és berendezés sejttenyészet előállítására 1 A találmány tárgya új eljárás sejttenyészet, interferon vagy vírus előállítására állati vagy emberi eredetű fíbroblaszt- vagy hámsejtek porózus szervetlen hordozó, előnyösen üveg vagy önmagában ismert porózus szerves polimer hordozó felületén monomolekuláris rétegben, önmagában ismert táptalajon, steril körülmények között, in vitro történő tenyésztésével, továbbá berendezés az eljárás kivitelezésére. A következőkben „monomolekuláris” sejttenyészeten a sejtek rendkívül vékony, egy sejtnek megfelelő vastagságú rétegét értjük. Sejtek vagy mikroorganizmusok in vitro történő tenyésztésének két fő módszere ismert: az egyiknél a tenyésztést szuszpenzió formájában végezzük keverővei ellátott reaktortartályban, a másiknál pedig hordozó felületén monomolekuláris rétegben. Általában a szuszpenzióként történő tenyésztés csak meghatározott, fonál alakú sejtek, limfocita típusú sejtek, így normál limfociták, tumor sejtek, például Burkitt-féle limfoma sejtek és leukémiás izomsejtek esetében felel meg. A lemezeket vagy szalagokat képező sejtek, például a fibroblaszfok és a hámsejtek, hacsak át nem alakítjuk őket, szilárd hordozót igényelnek, amelyen növekedhetnek. A jelen találmány is ez utóbbi sejttenyésztési módszert alkalmazza. A monomolekuláris sejttenyészet laboratóriumi méretben történő előállítása egyszerű eljárással megoldható, amelynek során a sejtek egy palack 2 belső falfelületén helyezkednek el, és ellepi őket a táptalaj. Úgy is eljárhatnak, hogy a palackba kisebb mennyiségű táptalajt töltenek, és a hosszanti tengelye mentén forgatják úgy, hogy a táptalaj 5 vékony filmként áramlik folyamatosan a sejttenyészet felületén. Nagy tömegű monomolekuláris sejttenyészet előállításához nagy hordoz ófelületet kell biztosítani a sejtek számára. Az elárasztásos módszert olyan 10 módon alkalmazták nagy tömegű tenyészet előállításához, hogy közömbös részecskéket diszpergáltak a folyékony táptalajban. Ennek az eljárásnak a továbbfejlesztését ismerteti az 1 267 136 számú nagy-britanniai szabadalmi leírás, amely szerint kis 15 szilíciumdioxid gömböcskéket szuszpendálnak a táptalajban, és ezeknek a gömböcskéknek az összességében nagy felületén kötődhetnek meg és növekedhetnek a sejtek beoltás után. 20 Az 1 436 323 számú nagy-britanniai szabadalmi leírás olyan eljárást ismertet, amelynél a sejtek szűrőágyban helyezkednek el. Ennek az ismert eljárásnak előnye, hogy a beágyazott sejtek védve vannak az esetleges fizikai károsodásoktól, amelyek 25 például a gázbevezetéskor következhetnek be. r Az ismert eljárás további előnye, hogy a sejtek és a sejttermékek ülepítéses elválasztás nélkül nyerhetők ki, az elhasznált folyékony táptalaj gyorsan eltávolítható, és a sejtekhez áramoltatott folyékony táptalaj gyorsan 30 egy másik típusúra cserélhető ki. Az ismert eljárás-174045