173410. lajstromszámú szabadalom • Javított baktériumtáptalajt és timidin-foszforilázt tartalmazó kompozició, baktériumok folsav-antagonistákkal szemben mutatott érsékenységének kimutatására, továbbá eljárás a kombozició és az enzim előállítására
MAGTAB NÉPKÖZTARSASAG SZABADALMI LEÍRÁS 173410 Bejelentés napja: 1976.1. 27. Nagy-Britannia-i elsőbbsége: 1975.1.27. (3445/75) Közzététel napja: 1978. IX. 28. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Megjelent: 1979. VII. 31. (WE—533) Nemzetközi osztályozás: C 12 K 1/04, 1/06, C 12 D 13/10, C 07 G 7/028 Feltalálók: Tulajdonos: Bushby Stanley Róbert Monis mikrobiológus, Durham, The Wellcome Foundation Limited, Krenitsky Thomas Anthony biokémikus, Chapel Hill, London, Amerikai Egyesült Államok Nagy-Britannia Javított, baktérium-táptalajt és timidin-foszforilázt tartalmazó kompozíció baktériumok fólsav-antagonistákkal szemben mutatott érzékenységének kimutatására, továbbá eljárás a kompozíció és az enzim előállítására 1 2 A találmány tárgya javított, táptalajt és timidin-foszforilázt tartalmazó kompozíció baktériumok fólsav-antagonistákkal szemben mutatott érzékenységének kimutatására, mely kompozíció a baktérium-táptalajt tisztított baktérium-eredetű timidin-foszforilázzal kombinálva tartalmazza. A találmány tárgya tehát egy mikroba-táptalaj, amely alkalmas a fólsav-antagonistákkal, mikroba-ellenes szerekkel, például szulfametoxazolíal (SMX) és/vagy trimetoprimmel (TMP) szemben érzékeny- 10 séget mutató baktériumok kimutatására. Már jó néhány éve ismert, hogy a szokásosan alkalmazott táptalajok gyakran alkalmatlanok a baktériumok szulfonamidokkal vagy trimetoprimmel szembeni érzékenység kimutatására, azaz olyan 15 szerekkel szembeni érzékenység kimutatására, amelyek befolyásolják ezekben az organizmusokban a folátok szintézisét. Az alkalmatlanság abban nyilvánul meg, hogy a sorozat-hígítási módszernél elnyújtott végpontokat mutatnak, a diffúziós mód- 20 szer alkalmazása esetén pedig részleges növekedést mutatnak a gátlási zónában. Bushby [Med. J. A üst. Special Supplement, 1, 10 (1973)] és Koch és Burchall [Applied Microbiology, 22, 812 (1971)] kimutatták, hogy a timidin igen hatásos ellenszere 25 a szulfonamidok és a trimetoprim gátló hatásának. 1945-ben Harper és Cawston [J. Paht. Bact., 57, 59 (1945)] ismertették, hogy ló-vér-lizátum hatására a kevéssé érzékeny táptalaj átalakul kielégítő érzékenységűvé. E publikáció és számos egyéb 30 szerző munkájának ismertté válása óta általános gyakorlattá vált, hogy a baktérium-ellenes érzékenységi próbáknál a táptalajhoz ló-vér-lizátumot adtak annak érdekében, hogy csökkentsék a szul- 5 fonamidok okozta gátlási zónában az észlelt részleges növekedést. A közelmúltban kimutatták, hogy ez a módszer a trimetoprimes vizsgálattal kapcsolatban is hatásos [Bushby, Postgraduate Med. J., 45, 10 (1969), Darrell és munkatársai, J. Clin. Path., 21, 202 (1968)]. Harper és Cawston megállapította, hogy a) szulfonamid-antagonista anyagok semlegesítésére a ló-vér-lizátum hatásosabb, mint a teljes vér, b) néhány más fajtának a vére hatástalan, c) a lizátum hatása növekszik az inkubációs idővel és a hőmérséklettel (egészen 30 C°-ig), és d) a lizátum nem befolyásolja a p-aminobenzoesav hatására bekövetkező szulfonamid-gátlás megszüntetését. Ebből arra következtettek, hogy a ló-vér-lizátum tartalmaz egy faktort, amely semlegesíti a szulfonamid-antagonista anyag(ok)at. Ez az úgynevezett Harper-Cawston-faktor csak olyan táptalajban hatásos, amely mérsékelt mennyiségű, azaz mintegy 0,1-15 p/ml timidint tartalmaz. 0,1 pml alatti mennyiség esetében nem antagonizálódik a hatóanyagok hatásossága, vagyis ilyen kis mennyiségű timidin eltávolítása nem befolyásolja az észlelt hatóanyag-gátlást. Nagy adag timidin ese-173410
