172960. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Streptomyces fradiae törzsek pronáz termelésének fokozására és pronáz fermentációjára
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 172960 Bejelentés napja: 1975. XII. 31. (HO—1868) Nemzetközi osztályozás: C 12 D 13/10, C 12 K 1/06 Közzététel napja: 1978. Hl. 28. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Megjelent: 1979. VII. 31. dr. Horváth Istvánná vegyész 45%, Inczefi István mikrobiológus 35%, Rezessy Gábomé vegyészmérnök 10%, dr. Somfai Éva vegyészmérnök 10%, Budapest Eljárás streptomyces fradiae törzsek pronáz termelésének fokozására és pronáz fermentációjára 1 Ismeretes, hogy a proteolitikus enzimek süllyesztett aerob tenyészetekben történő megjelenését jó ideig egyéb hasznos anyagcsere-termékekkel együtt, azoknak mintegy kisérőjeként regisztrálták. Számos tanulmány ismertette a mikroorganizmusok antibio- 5 tikum- és proteolitikus enzim- termelése közötti összefüggéseket. Később egyre több közlemény jelent meg, amelyben a Streptomyceseket csak proteáz-termélésre vizsgálták. [Biochim. Biophys. Acta 151, (2) (1968) 394, Mikrobiologija 10, 10 (1967) 492. J. Biol. Chem. 244, (1969) 789 stb.] Több közleményben ismertették a Streptomyces fradiae által termelt pronáz enzim sajátságait is. A pronáztermelő Act. fradiae 119 jelű törzs (a Szovjetunió Tudományos Akadénüáia Mikrobioló- 15 glai Intézetének törzse) termelőképességét vizsgálták a táptalaj összetevőinek függvényében. [Priklad. Biohim. Mikrobiol. (1969) 5, 273 és 5, 421.] Megállapították, hogy a termelést bizonyos ásványi sókkal fokozni lehet, a fehéijeforrások közül a 20 szójalisztet találták megfelelőnek a termeléshez. A proteáz termelésre kiválasztott Streptomyces illetve Actinomyces speciesekkel kapcsolatban az eddigi irodalomban főként az előállítható enzimpreparátumok tulajdonságaival, a felhasználási terű- 25 lettel és felhasználási technológiával foglalkoznak, kevés közleményben találtunk utalást az enzim előállításával kapcsolatos táptalajra, illetve a fermentációs paraméterekre vonatkozóan és alig találunk utalást törzsnemesítő munkára vonatkozóan. 30 2 így ismert, hogy Aspergillus niger-törzs glükamiláz-termelésének fokozására kombinált kobalt-60 sugárzást és N-metil-N’-nitro-N”-nitrozo-guanidin- (a továbbiakban MNG) — kezelést alkalmaztak. Microbiol-Abstr. Vol. 10, No.5 (1975) 10, 5, 5. A találmány tárgya eljárás fokozott mennyiségű pronáz termelésére fehérje-fonást, szénhidrátforrást és ásványi sókat tartalmazó táptalajon Streptomyces fradiae törzzsel végzett süllyesztett aerob fermentációval oly módon, hogy a fermentációt az aminoglükozid típusú antibiotikumot tartalmazó táptalajon túlélőkből szelektált törzzsel végezzük el. A találmány szerinti előkezeléshez, majd ezt követő fermentációhoz a Streptomyces fradiae speciesbe tartozó pronáz termelő törzsek bármelyikét alkalmazhatjuk. így alkalmazhatjuk pl. az UdSSR RIA 571, az IMRU 3739, az ETH 13 472sz. vagy az OKI 00 144/1975 sz. nyilvános gyűjteményekben letétbehelyezett törzseket. A fenti három törzs az ATCC-ben 10 745, 14 544, illetve 15 861 letéti számon szerepel. A találmány alapja az a felismerés volt, hogy antibiotikumokkal történd kezelésekkel a pronáz termelésére használt Streptomyces fradiae törzs befolyásolható: a törzs növekedése pl. neomidnnel bizonyos koncentráció határok között gátolható, sőt fokozott növekedés-gátlás figyelhető meg az aminoglükozid típusba tartozó más antibiotikumokkal pl. streptomídnnel, vagy gentamicinnel 172960
