172074. lajstromszámú szabadalom • Eljárás enzimes reakciók végrehajtására kétfázisú vizes-szerves rendszerek alkalmazására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG <$r^> ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1974.1. 25. (SA-2586) Olaszország-beli elsőbbsége: 1973.1. 26. (19642 A/73) Közzététel napja: 1977. XI. 28. Megjelent: 1978. XII. 30. 172074 Nemzetközi osztályozás: C 07 B 29/02 Feltaláló: Antonini Eraldo vegyész, Róma, Olaszország Tulajdonos: Snam Progetti S.p.A., I.S.F. Societa per Azioni, Milánó Olaszország Eljárás enzimes reakciók végrehajtására kétfázisú vizes-szerves rendszerek alkalmazásával 1 A találmány tárgya új eljárás enzimes reakcióknak kétfázisú, vizes-szerves rendszerekben való végrehajtására. Ismeretes, hogy enzimes reakciók azért mennek végbe vízben, mert a víz ideális oldószere az 5 enzimeknek, biztosítja azok szerkezeti stabilitását, amelytó'l katalitikus aktivitásuk függ. Ez a tény korlátozza azoknak a reakcióknak a véghezvitelét, amelyekben vízoldhatatlan kiindulási anyagokat (az enzim-katalizátorok szubsztrátjai), és 10 ezért szerves oldószereket kell alkalmazni. Ismeretes, hogy a szerves oldószerek általában denaturáló hatásúak az enzimekre, főleg a vízzel nem elegyedő oldószerek. Másrészt a vízzel nem elegyedő oldószerek szinte sohasem jó oldószerei az 15 enzimeknek, így az enzimes reakciókat általában nem vihetjük végbe homogén szerves fázisban. Ez a tény erőteljesen korlátozza mindazon szubsztrátoknak enzimes átalakítását, amelyek 20 gyengén vízoldhatók, pedig ezek közül némelyek (a szteroidok, terpének, lipoidszármazékok, a gyógyászati hatású liofil termékek stb.) alkalmazási és gazdasági szempontból igen érdekesek. Elképzelhető a szubsztrát jobb diszpergálása úgy, hogy ezt az 25 enzim vizes fázisában emuigeáljuk, ezt az elképzelést sok minden korlátozza, így a közönséges diszpergálószerek legtöbbje inaktiváló hatású az enzimre, valamint a módszer nem alkalmazható olyan szubsztrátok esetében, amelyeknek olvadás- 30 pontja szobahőmérséklet felett van. [J. L. Webb: Enzyme and Metabolic Inhibitors, Acad. Press, 1963, I. 13-317]. Ismeretes, hogy az enzimreakciók nemcsak vízben, hanem víz és szerves oldószer biner elegyében is végezhetők. Ilyen eljárást ismertet például a Chemical Abstracts 72, 15992p referátuma. Ezen hivatkozásból kitűnik azonban, hogy a koszolvenst szigorúan meghatározott mólarányban kell alkalmazni. Nyilvánvaló, hogy ezek a megkötések szakember számára megnehezítik egy ilyen eljárás lefolytatását. Ezenkívül a referátum csak néhány oldószert, így dioxánt és hosszúláncú alkoholokat ismertet, más szerves koszolvenseket nem. A fenti hátrányok ismeretében olyan koszolvenst kerestünk, melyek a fenti hátrányokkal nem rendelkeznek, azaz enzimreakciók során nem szükséges ezeket szigorú mólarányok között alkalmazni, és ugyanakkor nem denaturálják az. enzimet a reakció során. Meglepő módon úgy találtuk, hogy ilyen, enzimreakciók során víz-koszolvens oldószer-rendszerben alkalmazható szerves oldószerek mindenekelőtt a 2-8 szénatomos alifás karbonsav észterek, a 2-8 szénatomos alkiléterek, a 4-8 szénatomos alkoholok vagy adott esetben halogénezett 2-8 szénatomos alifás vagy aromás szénhidrogének. A találmány szempontjából lényeges, hogy az illető oldószer vízzel ne elegyedjen. 172074