171837. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1alfa-hidroxi-szteroidok előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1975. X. 17. (SchE—541) Elsőbbsége: Német Szövetségi Köztársaság 1974. X. 18. (P 24 50106.2), 1975. IX. 1. (P 25 39 261.4) Közzététel napja: 1977. X. 28. Megjelent: 1978. XI. 30. 171837 Nemzetközi osztályozás: C 07 J 1/00 C 07 B 29/02 Feltalálók: Dr. Petzoldt Kari vegyész, Dr. Elger Walter orvos, Nyugat-Berlin Tulajdonos: Schering AG., Bergkamen, Német Szövetségi Köztársaság, és Nyugat-Berlin Eljárás la-hidroxi-szteroidok előállítására i A találmány tárgya eljárás farmakológiailag hatásos, új la-hidroxi-szteroidok és e vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerek előállítására. Az új la-hidroxi-szteroidok I általános képletűek, ahol R2 és R 3 hidrogénatomot vagy 1—7 szénatomszámú alkanoilcsoportot jelent. A 3 880 895 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás és a Chem. Abstr. 81, (1974) 1185Y antiösztrogén hatású lß-hidroxi-szteroidokat, nevezetesen 1 ß-hidroxi-norgesztrelt, 1 ß-hidroxi-noretiszteront és ezek 1 ß-acetoxi-szarmazekait ismerteti. A találmány szerinti vegyületekben R2 és R 3 jelentése azonos vagy különböző lehet. Megfelelő R2 és R 3 alkanoilcsoport például a formil-, acetil-, propionil-, butiril-, pentanoil-, hexanoil- és a heptanoilcsoport. Az I általános képletű la-hidroxi-szteroidokat a találmány szerint úgy állítjuk elő, hogy valamely II általános képletű vegyületet — ahol Rt jelentése a fenti — Calonectria, Glomerella, Aspergillus, Septomyxa, Mucor, vagy Fusarium nemzetségű gombatenyészettel fermentálunk és kívánt esetben a szabad hidroxilcsoportokat észterezzük. A találmány szerinti eljáráshoz például a következő gombatörzsek használhatók: Glomerella glycines Calonectria decora Aspergillus clavatus Septomyxa affinis Mucor griseo-cyanus Fusarium ciliatum (ATCC 11871) (ATCC 14767) (ATCC 9598) (ATCC 6737) (ATCC 1207b) (CBS 13235) Előnyben részesítjük a Calonectria decora és az Aspergillus clavatus törzseket. A hidroxilezést olyan módszerekkel hajtjuk végre, amelyek a szteroidok gombatenyészetekkel történő mik-5 robiológiai hidroxilezésénél szokásosak és amelyeket a „Microbial Transformations of Steroids" (William Charney and Hershel L. Herzog, Academie Press, 1967) ismertet. Az általában szokásos előkísérletekkel elsősorban a 10 kedvező fermentálási körülményeket, így például a megválasztandó kedvező tápközeget, megfelelő szubsztrátoldószert, szubsztrát-koncentrációt és műszaki körülményeket — mint például a hőmérsékletet, levegőztetést, a tenyésztés pH-értékét és optimális idejét, a szubsztrát 15 adagolását és a mikroorganizmus enzimjével való érintkezését — határozzuk meg, analitikai módszerekkel, elsősorban vékonyrétegkromatográfiásan. E kísérletek alapján a használt szubsztrát-koncentrá-20 ció célszerűen 50—1000 mg/liter tápoldat. A pH értékét előnyösen 5—7-re állítjuk be. A tenyésztés hőmérséklete előnyösen 25—35 C°. A levegőztetés mintegy 1 liter levegő/perc/liter tenyészlé mennyiségű. A szubsztrát átalakulását célszerűen minták rétegkromatográfiás elem-25 zésével követjük. Általában 20—120 óra alatt kielégítő mennyiségű hidroxilezett szteroid képződik. A mikrobiológiai hidroxilezés folyamán a találmány szerinti I általános képletű la-hidroxi-szteroidok mellett gyakran keletkeznek izomer 1 ß-hidroxi-szteroidok is. 30 A képződött 1 ß-izomer mennyisége a szubsztrát szerke-171837 1
