169838. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a chinosporin-S és chinosporin-C új antibiotikumok előállítására 169839 Eljárás nagytisztaságú 7-szín-benziloximetil-norborn-2-én -5-on- üzemi előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1973. III. 27. (Cl—1357) Közzététel napja: 1976. IX. 28. Megjelent: 1977. XII. 31. 169838 Nemzetközi osztályozás: C 12 D 9/20 Feltaláló: DR. SIMON Ágoston orvos-mikrobiológus, Budapest Tulajdonos: Chinoin Gyógyszer és Vegyészeti Termékek Gyára Rt., Budapest Eljárás a chinosporin-S és chinosporin-C új antibiotikumok előállítására i Kísérleteink során kitűnt, hogy bizonyos, morfológiailag és fiziológiailag egymáshoz igen közel álló spórás baktérium-törzsek megfelelő körülmények közt antibiotikus hatású anyagot termelnek. E törzsek közelebbi vizsgálata kimutatta, hogy a Bacillus coágulans fajhoz tartoznak. E törzsek két jellemző képviselőjét az Országos Közegészségügyi Intézetben, a Mikroorganizmusok Nemzeti Gyűjteményében 0Ó99 és 0100 szám alatt letétbe helyeztük. Hangsúlyozzuk azonban, hogy a nevezett antibiotikus anyag termelésének képessége nem korlátozódik a két deponált törzsre, hanem megállapítottuk, hogy több más — nem deponált — B. coágulans törzs, valamint a Bacillus coágulans ATCC 7050 típustörzs is rendelkezik ezzel a képességgel. Feltételezhető, hogy ez az antibiotikum-termelő képesség az egész Bacillus coágulans species közös sajátsága. A Bacillus coágulans törzsek jól tenyésznek egyszerű táptalajokon, így a szokásos, antibiotikum-termelésre használatos nitrogén- és szén-forrásokat tartalmazó táptalajokon is. A fermentációs körülmények is megfelelnek a szokásos antibiotikum-termelési feltételeknek (rázott, illetve süllyesztett tenyészet percenként 0,1—1 térfogatnyi levegőátfúvással, 25—35 C° hőmérséklet, megfelelő keverés és habgátló alkalmazásával). A tipikus fermentációk levezetését az 1. és 2. példában adjuk meg. A termelt antibiotikus faktor vizsgálata kimutatta, hogy nem egy, hanem két különböző kémiai és biológiai tulajdonságokkal rendelkező antibiotikum keletkezik és legjobb tudomásunk szerint mindkettő különbözik minden eddig leírt antibiotikumtól. 1. Az első antibiotikum, amelyet chinosporin-S-nek neveztünk el, vízben kevéssé oldódik és sóinak vizes 5 oldatából híg savakkal kicsapható. Ezért a 'férmeritlé megsavanyításakor a baktériumokat és spórákat' tartalmazó csapadékba megy át. A kiülepedett csapadékot lehetőleg szárazra centrifugáljuk és poláros oldószerrel, pl. metanollal extraháljuk. Az extraktumot vákuumban, 10 alacsony hőfokon bepároljuk, mire sárga ragacsos anyag válik ki. A folyadékfázist elöntjük és a visszamaradó masszából enyhén lúgos vizes oldattal, előnyösen hidrogénkarbonát oldatokkal kioldjuk az antibiotikumot. Olajos fázis válik külön, amelynek nincs antibiotikus 15 hatása, tehát elvetjük. A vizes fázisból híg savval, előnyösen ecetsavval kicsapjuk az antibiotikumot. Sárga amorf anyagot kapunk, amelynek főbb' tulajdonságai a következők: ' 20 Vízben és híg savakban gyakorlatilag oldhatatlan, gyenge lúgokban oldódik, tömény erős savakban' és lúgokban elbomlik. Oldódik metanolban, etanolban, éterben, kloroformbán és általában zsíroldó szerves oldószerekben. Olvadáspont: 138 C°, bomlással. Jód-25 szám: 50, lúgfogyasztás: 18,8 ml 0,1 N NaOH/g. — Elemi analízis: 56%, 7,4% H, 7,7% N. Fentiek alapján a valószínű tapasztalati képlet: C25 H4 0 Ö 10 /N 3 . A valószínű összegképlet és a lúgfogyaszfás alapján számított molekulasúly (egybázisú savat feltételezve) 540—545. 30 A jódszám arra utal, hogy a vegyület egy kettős kötést 169838 1
