169120. lajstromszámú szabadalom • Eljárás stabil víruskészítmények előállítására

MAGTAB NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1974. II. 08. (RE- 547) Amerikai Egyesült Államok-beli elsőbbsége: 1973. II. 09. (330 912) Közzététel napja: 1976. IV. 28. Megjelent: 1978.1.31. 169120 Nemzetközi osztályozás: C12K9/00 ^ Feltalálók: Zygraich Nathan állatorvos, Brüsszel, Petermans Julien vegyész, Rixensart, Belgium Tulajdonos: Recherche et Industrie Thérapeutiques, Genval, Belgium Eljárás stabil víruskészítmények előállítására 1 A találmány tárgya eljárás stabil, sejtmentes víruskészítmények előállítására sejthez kötött vírusokból, új stabilizáló kompozíciók felhasználásával. Ismeretes, hogy a sejthez kötött vírusok csak igen nagy veszteségek árán különíthetők el a gazdasejtektől. E veszteségek kiküszöbölésére a reakcióközeghez olyan anyagokat vagy kompozíciókat adnak, amelyek stabilizálják a vírust a sejtek elroncsolása közben. Ismert az is, hogy a vírus tárolásakor és kezelésekor (például liofilizálásakor) fellépő veszteségek nagymértékben csökkennek, ha az elegyhez liofilizációs stabilizáló hatással rendelkező anyagokat vagy kompozíciókat adnak (lásd például a 3 519 710 sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírást). Ismert továbbá, hogy a dimetilszulfoxid stabilizálja a tokos vírusokat [J. of Virology 2, 953-4 (1968)] és a Newcastle-kór vírusát [Acta Virol. 16, 349-52 (1972)]. Az olyan ismert anyagok vagy kompozíciók többsége azonban, amelyek stabilizálják a vírust á sejtek elroncsolása közben, a további liofilizálás és tárolás során nem fejtenek ki jelentős stabilizáló hatást, és megfordítva, a liofilizációs stabilizátorok általában nem stabilizálják lényegesen a sejtmentes vírusokat a gazdasejtekből való elkülönítés során. Calnek és munkatársai [lásd például Appl. Microbiol. 70, 723-726 (1970)] a Marek-féle megbetegedés vírusának, valamint a pulyka-herpesvírus FC-126 jelű, a Marek-félé megbetegedéssel szemben védelmet biztosító törzsének kísérletes vizsgálata során olyan kompozíciót találtak, amely a sejtmentes vírusokat a sejtekből történő kivonás során és az azt követő liofilizálás, valamint a 5 tárolás alatt egyaránt stabilizálja: A kivonási és liofilizálási lépések, valamint a tárolás során egyaránt stabilizáló hatást kifejtő ismert kompozíciók főtömegükben állati fehérje-anyagból, nevezetesen albuminból és/vagy kazein-10 bői állnak. \ Általánosan ismert, hogy a gyógyszerekben jelenlevő állati fehérje-anyagok a szervezetbe jutva allergiás reakciókat válthatnak ki, az ún. „szérumbetegséget" például a szérumokban és vakcinákban 15 jelenlevő állati fehérjék okozzák [B. D. Davis és munkatársai: „Microbiology" 549. oldal (kiadó: Harpe and Row, Hagerstown, Maryland, Amerikai Egyesült Államok, 1973)]. A vakcinák stabilizálására felhasználandó fehérjéket előzetesen tisztítják 20 ugyan, e tisztítási műveletekkel azonban nem lehet terjes mértékben kiküszöbölni az egyéb, nem fehérje-jellegű allergen anyagok jelenlétét, amelyek további káros mellékhatások fellépéséhez vezetnek. Az allergiás reakciók kiküszöbölése érdekében tehát 25 az eddig felhasznált fehérje-típusú stabüizálószereket más, allergen hatással nem rendelkező anyagokkal kell helyettesíteni. Meglepő módon azt tapasztaltuk, hogy az ilyen típusú stabilizáló kompozíciókban a.fehérje-anyagot 30 előnyösen helyettesíthetjük a nem-fehérje jellegű, 169120