167326. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vízoldható enzimek oldhatatlanná tételére mikrokapszulába vagy gélbe zárás útján

MAGTAB NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1972. XII. 29. (MA-2439) Közzététel napja: 1975. IV. 28. Megjelent: 1976. VIII. 31. 167326 Nemzetközi osztályozás: C 08 b 21/12,21/14, C 08 g 41/04, C 07 g 7/02 Feltalálók: Tulajdonos: Rill Attüáné, Jancsik Veronika oki. vegyész 50%, dr. Keleti Tamás oki. vegyész 30%, MTA SzBK Biokémiai Intézete, di. Boioss László oki. vegyész 20%, Budapest Budapest Eljárás vízoldható enzimek oldhatatlanná tételére mikrokapszulába vagy gélbe zárás útján 1 A találmány tárgya eljárás a dehidrogénázok, acilázok, aldolázok, vagy peroxidázok csoportjába tartozó vízoldható enzimek oldhatatlanná tételére, az enzimnek felületi porikondenzációval kialakított poliamidból vagy koacervációval kialakított nitro- 5 cellulózból készült mikrokapszulába vagy polimerizációval készített poliakrilamid gélbe való bezárása útjáa Ismeretes, hogy az enzimek vízoldhatatlanná tételére egyre nagyobb gyakorlati jelentőségre tesz 10 szert, minthogy egyre több ipari, tudományos és klinikai felhasználási lehetőségüket fedezik fel (De Rosnay: La Recherche 2, 571 (1971), Falb: Biotechnol. Bioeng. Symp. No. 3, 177 (1972, Guilbault: Biotechnol. Bioeng. Symp. No. 3, 361 15 (1972)). A vízoldhatatlan enzimek ipari szempontból elsősorban azért jelentősek, mert egyszerűen kezelhetők és többször is felhasználhatók. Az oldhatatlan enzimek vizsgálatát elméleti—tudományos szempontból az teszi különösen jelen- 20 tőssé, hogy az enzimek a természetben a sejtekben főleg a sejt különböző membránjaihoz kötött, ill. azokba bezárt állapotban fordulnak elő. Ezért az élő szervezetben lejátszódó folyamatok modellezésében is jelentősek a mesterségesen létrehozott 25 enzim-membrán-rendszerek (Chang, Biotechnol. Bioeng. Symp. No. 3, 395 /1972/). Az enzimeket az alábbi eljárások egyikével lehet vízben oldhatatlanná tenni: fizikai adszorpció egy vízoldhatatlan hordozó felületén, kovalens vagy 30 ionos kötés létrehozása egy vízoldhatatlan hordozóval, kovalens kötések létrehozása enzimmolekulák és bi- vagy polifunkciós reagensek között, az enzimek bezárása mikrokapszulába vagy gélbe. Kovalens kötéssel való vízoldhatatlanná tétellel számos szabadalmi leírás foglalkozik. Példaként megemlítjük az 1 274 869 számú nagy-britanniai szabadalmi leírást, amely szerinti az enzimet oly módon teszik vízben oldhatatlanná, hogy azt kovalensen kötik egy etilén-maleinsavanhidrid kopolimer felszínén. Az 1 276 006 számú nagy-britanniai szabadalmi leírás szerint az enzimet metil-viniléter és maleinsavanhidrid kopolimerével reagáltatják, majd az így keletkezett enzim-kopolimer komplexet keresztkötésekkel összekötik. A fizikai adszorpcióval, kovalens vagy ionos kötéssel, illetve keresztkötések létrehozásával vízben oldhatatlanná tett enzimek nem védettek a reakcióelegyben jelenlevő nagy molekulasúlyú károsító anyagokkal és proteolitikus enzimekkel szemben. A gélbe vagy mikrokapszulába zárt enzimek gyakorlati előnye a más módszerekkel vízoldhatatlanná tett enzimekkel szemben, hogy a bezárás védelmet biztosít ezekkel a károsító anyagokkal szemben. Ismeretes olyan módszer is, amely szerint úgy állítanak elő vízoldhatatlan enzimkészítményeket, hogy a más módszerrel vízben oldhatatlanná tett enzimet zárják poliakrilamid gélbe vagy mikrokapszulába. Ilyen eljárást ismertet a 2 252 888 számú NSZK-beli nyílvánosságrahozatali írat. E 167326