163794. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szaramicetin elkülönítésére

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1972. V. 19. (SU-737) Amerikai Egyesült ÁUamok-beli elsőbbsége: 1971. V. 21. (145 954) Közzététel napja: 1973. V. 28. Megjelent: 1975. VI. 30. 163794 Nemzetközi osztályozás: C 12 d 9/02 9/14 Feltalálók: aszalós Adorján vegyész, Princeton, Robison Robert Selig vegyész, North Brunswick, Lemanski Paul Peter vegyész, Kendall Park, BWnkevich Nicholas vegyész, Princeton, Sew Jersey, Amerikai Egyesült Államok Tulajdonos: E. R. Squibb and Sons, Inc. Princeton, New Jersey, Amerikai Egyesült Államok Eljárás szaramicetin elkülönítésére l A találmány tárgya eljárás a szaramicetin anti>iotikum elkülönítésére fermentlevekből. A baktériumok és gombák ellen hatásos, polijeptid jellegű szaramicetin antibiotikumot a )14 683 számú brit és az 1122 670 számú német 5 izövetségi köztársasági szabadalmi leírások ismeretik. A szaramicetint a Streptomyces saraceticusíak előnyösen szójabablisztet, nyerscukrot, kuko•icalekvárt, káliumdihidrogénfoszfátot és habzás^átlószerként disznózsírból préselt olajat tártai- 10 nazó közegben való tenyésztésével állítják elő. Eddig a szaramicetinnek a fermentléből való slkülönítésére a fermentlevet alumíniumszulfáttal is foszforsavval megsavanyították 4 pH-ra, és a nicéliumot szűréssel elkülönítették. Az antibioti- 15 cumot tartalmazó micéliumot a táptalaj egyharnad térfogatának megfelelő térfogatú butanollal ixtrahálták. A derített butanolos kivonatot eredeti -érfogatának harmincadára bepárolták, a csapadékot szűrőn elválasztották, és megszárítva szilárd 20 lyerstierméket kaptak. Az antibiotikum tisztítása úgy történt, hogy a íyers terméket metanolban alumíniumoxiddal késelték, ezt a terméket butanolos oldatból 7,5 pH-jú rizes alkalikus oldattal extrahálták, a kapott bázi- 25 ÍOS oldatot 3,5 pH-ra megsavanyították, és az uitibiotikumot ellenáramú megosztással butanol is víz között, a butanolt és a vizet 3 : 1 vagy 4:1 irányban alkalmazva extrahálták. Az antibioticumot butanol és víz elegyében kovasavgél vagy 30 vizet tartalmazó kovaföld oszlopon kromatografálva tovább tisztították; a végső tisztítást metanolban bázisos alumíniumoxid oszlopon kromatografálva végezték. Ennek a régebbi eljárásnak előnyös módozatában az első butanolos extrahálással kapott nyers antibiotikumot (1) alumíniumoxiddal kezelték; (2) a keletkezett csapadékot a butanolos oldatból 7,5 pH-jú vizes alkáli oldattal extrahálták (szétválasztó extrahálás), a bázisos oldatot 3,5 pH-ra megsavanyították, és butanollal extrahálták; (3) a butanolos oldatot kovasavgél oszlopon megoszlásosan kromatografálták; (4) a (3) műveletben kapott leghatásosabb frakciókat metanolban feloldották, és metanollal és 15% víz hozzáadásával dezaktivált lúgos alumíniumoxiddal töltött oszlopon kromatografálták. Ez a módszer fáradságos laboratóriumi és próbaüzemi eljárásnak bizonyult, és ipari méretekben való gyártásra nem volt alkalmas. Most azt találtuk, hogy a nyers táptalajból a szaramicetin termék viszonylag egyszerűen és hatékonyan elkülöníthető egy nagyipari méretekben könnyen végrehajtható új eljárással. Az eljárás lényeges fokozatai a teljes fermentléből kapott nyers szűrőlepény extrahálása metanollal, a metanolos kivonatból kapott vizes koncentrátum extrahálása butanollal és az így kapott nyers (20—35% tisztaságú) antibiotikum oldatának átbocsátása egy kromatografáló oszlopon. így 80% tisztaságú vagy ennél még L63794 1