163700. lajstromszámú szabadalom • Eljárás puromicin előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY A bejelentés napja: 1972. II. 29. GO-1193 Közzététel napja: 1973. V. 28. Megjelent: 1975. V. 31. 163700 Nemzetközi osztályozás: C 12 d 9/14 Feltalálók: SZÉLL Valéria oki. vegyészmérnök, 30% TÓTH Sarudy Éva oki. vegyész, 30% Dr. GYIMESI József oki. vegyész, 15% Dr. HORVÁTH István oki. vegyész, 15% Dr. RICHTER János oki. vegyész, 10% Budapest Tulajdonos: Gyógyszerkutató Intézet, Budapest 1 Eljárás puromicin előállítására A találmány tárgya eljárás kísérő komponensektől gyakorlatilag mentes puromicin előállítására a Streptomyces alboniger törzs 24—29 C°-on, komplex fehérjét, szénforrást és adalékokat tartalmazó táptalajon végzett tenyésztése, majd a képződött 5 puromicinnek a szűrletből történő elkülönítése útján. A puromicint először Porter és munkatársai [Antibiotics and Chemotherapy 2, 409 (1952)] írták le. A Streptomyces alboniger tenyészetéből izo- 10 Iáit puromicin lebontás útján levezetett szerkezetét Waller és munkatársai [J. Ám. Chem. Soc. 75, 2025 (1953); 80, 2736 (1958)] közölték. A puromicin szerkezetét Baker és munkatársai (J. Am. Chem. Soc. 76, 4044 (1954)] szintézissel is igazolták. 15 A puromicin oly módon gátolja a fehérje-szintézist, hogy a transzfer-ribonukleinsav helyett kapcsolódik a riboszómán levő peptidlánc C-terminális végéhez. A képződött peptidil-puromicin stabilis amidkötés létrehozásával megakadályozza további 20 aminosanosavak kapcsolódását. A puromicin széles spektrumú antibiotikum, mely a baktériumok, protozoák, növényi és állati szövetek fejlődését egyaránt gátolja. A baktériumok közül gátolja többek között a Staphylococcus albus, 25 Staphylococcus aureus, Sarcina lutea, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Escherichia coli, Bacillus cereus, Bacillus subtilis és Salmonella pullorum növekedését. A puromicin előállítására valamennyi eddig 30 ismert eljárás (2 763 642,2 797187 és 2 985 564 számú USA-beli szabadalmi leírások) természetes alapú táptalajt alkalmaz, és a Streptomyces alboniger törzs tenyésztésével állítja elő az antibiotikumot. Az ismert eljárások hátránya a hosszú (70— 140 óra) fermentációs idő. A 2 797 187 és 2 985 564 számú USA-beli szabadalmi leírásokban a puromicin termelési szintjének emelésére leírt anyagokkal, így az etiléndiamin-tetraecetsavval, húgysavval, adeninnel és guaninnal nem tudtuk reprodukálni az ott közölt eredményeket. A találmány célja kísérő komponensektől gyakorlatilag mentes puromicin előállítása nagy koncentrációban, rövid fermentációs idő alatt. A találmány alapja az a felismerés, hogy bizonyos mennyiségű Co 2 + -ion jelenléte a táptalajban kedvezően befolyásolja mind a fermentáció idejét, mind a keletkező puromicin mennyiségét és tisztaságát. A találmány újdonsága tehát abban áll, hogy a puromicin termelést Co 2 + -ion tartalmú táptalajon végezzük, ily módon nagy koncentrációban keletkezik kisérő komponensektől mentes puromicin. A találmány tárgya eljárás kísérő komponensektől gyakorlatilag mentes puromicin előállítására, az ismert Streptomyces alboniger törzs (MNG—87) (USA-beli törzsgyűjteményből; jelzése: ATCC 12 462) 24—29 C°-on, komplex fehérjét, szénforrást és adalékokat tartalmazó táptalajon, aerob körülmények között végzett tenyésztése, majd a képződött puromicinnek a szűrletből történő izo-163700 1
