163335. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-terminális L-prolilcsoporttal szubsztituált inzulinok és származékaik előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 163335 f£f| C 07 gl 5/00 A 61 k 17/02 y • - • • - • . . «ipp Bejelentés napja: 1970. IV. 7. (SU-522) C 07 gl 5/00 A 61 k 17/02 y • - • • - • . . ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL ( , • \ ' ' ' •••• ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1973. II. 28. Megjelent: 1974. X. 31. i Feltalálók: BODÁNSZKY Miklós vegyész, Shaker Heights, Ohio LANGLYKKE Asger Funder vegyész, Plainfield, New Jersey SHEEHAN John Timothy vegyész, Middlesex, New Jersey, Amerikai Egyesült Államok Tulajdonos: E. R. SQUIBB AND SONS, INC-cég, New York, Amerikai Egyesült Államok Eljárás N-terminális L-prolilcsoporttal szubsztituált inzulinok és származékaik előállítására 1 A találmány tárgya eljárás új, N-terminális L-prolilcsoporttal szubsztituált inzulinok, védett alakjaik és cink- és alkalikus proteinkomplexeik előállítására. Meglepetéssel tapasztaltuk, hogy az inzulin hatásának időtartama N-terminális L-prolinnal való szubsztituálás révén megnövelhető. Ennek a növekedésnek az oka nem teljesen ismeretes, de feltételezhető, hogy az L-prolil csoport ellenállóbbá teszi a hormont a szervezetben jelenlevő különféle enzimek, mint például az aminopeptidázok, lebontó hatásával szemben, amelynek a következménye az eddig rendelkezésre állt inzulinkészítmények többé-kevésbé gyors megemésztése. Ennek következtében viszonylag gyakran kell inzulint befecskendezni, hogy a cukorbetegek szervezetében kellő inzulinszintet lehessen fenntartani a betegséggel járó magas vércukorszint leszorítására. A találmány révén olyan termék áll rendelkezésre, amely feleslegessé teszi az ilyen gyakori befecskendezést, és ezáltal nagymértékben egyszerűsíti a betegség kezelését. A szükséges befecskendezések számának csökkentése nyilvánvalóan igen jelentős előny. Eltekintve a kényelmi szempontoktól, a rendszerint a beteg által végzett gyakori befecskendezéssel járó fertőzés veszélye is csökken. Éppen ezért a hosszabb aktivitású inzulinkészítmények kidolgozására irányuló kutatás több mint 30 éve folyik. A találmány szerinti eljárásban kiindulási anyagként felhasználható állati eredetű inzulinok sertések, szarvasmarhák, bálnák, halak és más állatok hasnyálmirigyéből különíthetők el. Különösen előnyös a sertések hasnyálmirigyéből kapott, közönségesen sertésinzulinnak nevezett inzulin. A találmány értelmében a prolilcsoporttal szubsztituált inzulinok előállítására inzulint védett nitrogén-5 csoportot tartalmazó prolin aktív észterével, például (N-terc-butiloxikarbonil-L-prolin)-p-nitrofenilészterrel acilezünk. Adott esetben más (N-terc-butiloxikarbonil-L-prolin)-aktív észterek, mint például N-hidroxiszukcinilészterek, fenilészterek és szubsztituált fenil-10 észterek, pl. negatívan szubsztituált fenilészterek, mint a tiofenilészterek, nitrofenilészterek, dinitrofenilészterek, nitrofeniltioészterek, cianofenilészterek, halogénezett fenilészterek stb., is alkalmazhatók az acilozási műveletben. Az acilozás révén védett prolil-15 va gy glicilinzulin-származékok keletkeznek, a keletkezett származék természete, mint a példákból kitűnik, a kiindulási anyagok viszonylagos mennyiségétől függ. A védőcsoportot, például a terc-butiloxikarbonil-csoportot, eltávolíthatjuk a végső Nw -prolilcsoport-20 tal szubsztituált inzulintermék előállítása céljából. A védőcsoport eltávolítására előnyösen trifluorecetsav alkalmazható, noha bármilyen ismert módszer felhasználható, például hidrogénhalogenidbs (hidrogénbromidos vagy sósavas), ecetsavas vagy más ismert 25 savas kezelés. Maguknak a találmány szerint előállított Noj-prolilcsoporttal szubsztituált inzulin termékeknek cukorbajosok kezelésére való használata helyett e termékekből készült különféle komplexek és készítmények 30 is alkalmazhatók e prolilinzulin-származékok hatástar-163335
