162334. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rabelomicin és dehidrorabelomicin antibiotikumok előálítására
SZABADALMI 162334 MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG LEÍRÁS ifyh Nemzatkózi osztályozás: C 12 d 9/14 Igig» Bejelentés napja: 1971. V. 20. (SU-625) ^^ Elsőbbsége: Amerikai Egyesült Államok, 1970. VI. 18. (47 479) f^ J& I L i A /".''T?* ORSZÁGOS Közzététel napja: 1972. VIII. 28. X^/iíl o i (1 c «ä^ TALÁLMÁNYI HIVATAL Megjelent: 1974. X. 10. Ftltaláló(k): Meyers Edward vegyész, East Brunswick Slusarchyk Dorothy S. vegyész. Belle Mead, Liu Wen-Chih vegyész, Princeton Junction. Parker William L. vegyész. North Brunswick, New Jersey, Amerikai Egyesült Államok. Tulajdonos: E.R. Squibb and Sons, Inc., New York, Amerikai Egyesült Államok. Eljárás rabelomicin és dehidrorabelomicin antibiotikumok előállítására 1 A találmány tárgya eljárás az új (I) képlétű rabelomicin és annak (II) képletű dehidratált származéka előállítására. A rabelomicint termelő mikroorganizmus egy Streptomyces törzs, amelyet a továbbiakban Streptomyces olivaceus ATCC 21549-nek nevezünk. A mikroorganizmust egy 5 Jean-Rabelben (Haiti) vett talajmintából különítettük el. Az élő mikroorganizmus tenyészetét deponáltuk az American Type Culture Collection (Rockville, Maryland, Amerikai Egyesült Államok) törzsgyűjteményében, és onnan bárki beszerezheti. ATCC száma 21549. 10 A Streptomyces olivaceus mikroorganizmust számos antibiotikum előállítására felhasználták. Ilyenek például a granaticin, egy C22 H J0 O, 0 összegképletű triciklusos tetrahidroxikinon- karbonsav |Corbaz ás munkatársai: Helv. Chim. Acta 40^ 1262-1269 (1957)1; a P.A. 144A és P.A. 144Bjelű 1b antibiotikumok (819 872 számú brit szabadalmi leírás); egy kloroformban oldhatatlan, vízben oldható antibiotikum fjíordarski és munkatársai: Arc. Immunol. Ther. Exp. 1969,-17/5), 639-648J . Azonkívül B,, vitamint találtak a Streptomyces olivaceus bizonyos fermetleveiben [Chem. Zuesti 15^ 20 346-359 (1961) f. Felhasználták továbbá szteroidok hidroxilálására (Rev. Latinoamer. Microbiol. Parasitol. 1968, 10/2/, 55-62). A találmány nem korlátozódik egyedül az itt leírt mikroorganizmusra, hanem többek között felöleli a leírt 25 mikroorganizmusból mutációt előidéző szerekkel vagy behatásokkal, például röntgensugarakkal, ultraibolya sugárzással vagy nitrogénmustárral előállított rabelomicint termelő mutánsokat is. A mikroorganizmus elkülönítésére és karakterizálására a 30 talajmintát steril desztillált vízzel rázzuk, és a következő összetételű agar táptalajon tenyésztjük: g agar 15 glicerin ] 0 citromsav 1,2 35 (NH4 ) 2 HP0 4 0,4 KCl 0,08 MgCl2 .6H,0 0,418 MnCl2 .4H 2 0 0,036 FeCl3 .6H 2 0 0,023 ZnCl2 .6H 2 0 0,021 CoCl2 .6H 2 0 0,004 desztillált vízzel kiegészítve 1000 ml-re. A táptalajt beállítjuk 7,0 pH-ra, és autoklávban 121 C'-on 30 percig sterilizáljuk. Hét-tíz napi 25 C*-on való inkubálás után a Streptomyces ovivaceus ATCC 21549 telepeket elválasztjuk a táptalajtól, és az elkülönített telepeket a következő összetételű táptalajon tenyésztjük: g húskivonat 1,0 élesztőkivonat 1,0 NZ amine A • 2,0 glukóz 10,0 agar 15,0 desztillált vízzel kiegészítve 1000 ml-re. A táptalajt beállítjuk 7,3 pH-ra, és 121 C*-on 30 percig autoklávban sterilizáljuk. A mikroorganizmus Pridham szürke színű spórás sorozatának tagja. Középszűrke (ISCC 265 sz.) spóratömeget termel, a szín megfelel a Color Harmony Manual 2 Fe színének. A spóraképzés bőséges standard International Streptomyces Project közegeken (ISP-2, élesztőkivonat-malátakivonat agar; ISP-3 zabliszt agar; ISP-4 szervetlen sókkeményítő agar). A fonák színe ezen a három táptalajon :középbarna. Fehérjés táptalajon nem termel melanoid pigmentet. Mikroszkópban a spóratartók nyúlt spirálisok, és a spóra felülete sima. A Streptomyces olivaceus ATCC 21549 és a Streptomyces olivaceuv tipustörzse közötti hasonlatosságok és különbségek a következők: 162334
