158003. lajstromszámú szabadalom • Fermentációs eljárás lizosztafin előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG $> -^t <^> ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 158003 Nemzetközi osztályozás: C 12 d 9/20 Bejelentés napja: 1968. VI. 10. (ME—953) Közzététel napja: 1970. VI. 06. Megjelent: 1971. III. 01. SEsSäfini^ ifimntir t*\i\in\ \ Feltalálók: Zygmunt Walter Anthony vegyész, Browder Henry Polk vegyész, Evansville, Indiana, Amerikai Egyesült Államok Tulajdonos: Mead Johnson and Company cég, Evansville, Indiana, Amerikai Egyesült Államok Fermentációs eljárás lizosztafin előállítására A találmány a lizosztafin . fermentáció útján történő előállításának tökéletesítésére vonatkozik. A lizosztafin oly antibiotikum, amely specifikus képességgel rendelkezik a Staphylococcus nemhez tartozó mikroarganiizmusok lízisére._ Ennek az antibiotikumnak a fermentáció útján történő előállítását a 3 278 378 sz. amerikai szabadalmi leírás ismertette. Az idézett 3 278 378 sz. amerikai szabadalmi leírás oly fermentációs eljárást ismertet, amelynek során Staphylococcus staphylolyticus mikroorganizmust szaporítanak nitrogénforrásként fehérje-jellegű tápanyagokat, mint kazein peptonpankreászos digesztátumát, szójaliszt papaines digesztätumät vagy hasonló termékeket tartalmaz. Ismerteti ez a leírás azt is, hogy a fermentációs közeg a fermentáció korai szakaszaiban hajlamos arra, hogy savassá váljék. Ezt a hajlamot a fermentáció előrehaladásával ellensúlyozza bázisos anyagoknak, feltehetőleg ammóniának a szabaddá válása, ami azzal a következménnyel jár, hogy a fermentáció későbbi szakaszaiban a közeg pH-értéke erősen emelkedik. Az organizmus lizosztafin-termelésére azonban mindkét említett körülmény hátrányos, minthogy e szempontból a 7,3—7,7 pH-érték bizonyul a legelőnyösebbnek. Ezeket a viszonyokat a csatolt rajz 1. ábrája szemlélteti, amelyen három görbe látható ugyanabban a derékszögű koordináta-rendszerben. Mindhárom görbe ugyanarra, a 3 278 368 sz. amerikai szabadalmi leírásban leírt módon lefolytatott lízosztafin-termelő fermentációra vo-5 nartkozik, az alább megadott összetételű tápközeg alkalmazásával. A fermentáció 13 óra hosszat történt 37 C° hőmérsékleten, 45 liter űrtartalmú rozsdamentes acél fermentorban, 20 liter tápközeg alkalmazásával. Inokulumként 10 a Staphylococcus staphylolyticus NRRL B—2628 törzs került alkalmazásra. A fermentációs közeg pH-értéke kezdetben 7,3 volt beállítva. A fermentáció folyamán a közeg térfogategységére számítva percenként 1 térfogat levegővel volt 15 szellőztetve. A tápközeg összetétele: kazein enzimes hidrolizátuma (NZ Amine E) 4,8 súly% 20 szója-pepton (Phytone) 0,5 súly% nátriumklorid. 0,5 súly% dikáliumhidrogénfoszfát 0,25 súly% dextróz 1,0 súly% 25 Az 1. ábrán a folytonos vonallal rajzolt görbe a jobboldali ordinátára vonatkozik, amelyen a pH-érték skálája van feltüntetve. Az abszcissza az órákban kifejezett időt adja meg, balról jobbfelé olvasva. A kezdetben 7,3 pH-érték a 30 fermentáció folyamán a 6,15 minimális pH-158003