150555. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a B12-vitamin elválasztására az egyéb kobalaminszármazékoktól
Megjelent: 1963. szeptember 30. MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS , r , C S'/o ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL 1 150.555 SZÁM Nemzetközi osztály: Magyar osztály: B 01 d Rí—231 ALAPSZÁM 12 p 11—17 SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Eljárás a Bi2-vitamin elválasztására az egyéb kobalamin-származékoktól Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rt., Budapest Feltaláló: Ezer Elemér vegyészmérnök, Budapest A bejelentés napja: 1961. június 8. Ismeretes, hogy a Br2-vitamin fermentációs ipari előállítása során kapott nyers fermentációs lében a Bi2-vitamin különféle egyidejűleg képződött egyéb kobalamin-származékok, ún. faktorok kíséretében van jelen, amelyek a fermentációs lé feldolgozása és a kapott termék bekoncentrálása során a B 12 -vitaminnal együtt kerülnek a koncentrált és tisztított oldatba. Ez a viszonylag tömény és tiszta oldat a Bi2-vitamin és a szintén értékes III-faktor mellett nagy menynyiségben tartalmaz biológiailag kevésbé értékes vagy értéktelen, ún. inkomplett kobalaminokat is, amelyeknek a mennyisége meghaladja a Bi2-vitaminét, sőt egyes fermentációkban annak ötszörösét is elérheti. A Bi2-vitamin ipari előállításának egyik nehéz problémáját képezi a tiszta Bi2-vitaminnak az elválasztása ezektől a részben értékesíthető, részben pedig biológiai szempontból értéktelen faktoroktól. Ennek az elválasztásnak a gyakorlati megoldására már számos iparilag alkalmazható módszert dolgoztak ki. Ezek a részben oldószeres tisztítási műveleteken (pl. 859 352 számú német szabadalmi leírás), részben pedig ioncserélő gyantákon (912 621 számú német szabadalmi leírás), vagy egyéb adszorbenseken, pl. montmorilloniton (929 987 számú német szabadalmi leírás) történő adszorpción alapulnák. Ismeretesek továbbá olyan eljárások is. amelyek szerint tiszta oldószeres extrakcióval vagy ionoforétikus úton történik a Bi2-vitamin és az egyéb kobalamin-származékok szétválasztása (pl. 144 197, 143 549r 144 069, és 145 171 számú magyar szabadalmi leírások). Javasoltak már olyan eljárást is, amely szerint a Bi2-vitamin és az egyéb kobalamin-származékok szétválasztása cellulózporból készített oszlopon, megoszlásos kromatográfia útján történik (930 651 számú német szabadalmi leírás). Ezeknek az eljárásoknak az ipari kivitele azonban számos nehézséggel jár. Az oldószeres tisztítási módszerek általában nagy mennyiségű oldószert és sok munkát igényelnek és emiatt kevéssé gazdaságosak. Az ioncserélő gyanták alkalmazásának korlátot szab az a körülmény, hogy az ioncserélők kapacitása a B 1 2-vitaminra csekély, emellett a B1 2-vitaminnak, illetve a rokon származékoknak a gyantáról való leoldása igen nehézkes művelet. A cellulóz-oszlopon végzett megosztásos kromatográfia ipari mértékben alig kivitelezhető, bonyolult eljárás. A találmány tárgyát olyan új, műszakilag könynyen kivitelezhető és gazdaságos eljárás képezi, amelynek segítségével a Bi2-vitamin egyszerű módon is jó hatásfokkal választható el egyrészt az ionkomplett kobalamin-származékoktól, másrészt a III-faktortól is. A találmány szerinti eljárás lényege az, hogy a nyers fermentációs termék ismert módon történő feldolgozása során kapott tisztított és töményített vizes, vagy vizesalkoholos oldaot, amely a B|2-vitamin mellett még a kísérő kobalamin-származékokat is tartalmazza, H-alakban levő oxicellulózt tartalmazó oszlopon folyatjuk át. Az oxicellulóz szelektíven megköti az oldatban levő összes inkomplett fak torokat és így az oszlopról lefolyó oldatban már kizárólag Bi2-vitamin és III-faktor van jelen, amelyek az oxicellulózon egyáltalán nem kötődnek meg. Ennek az oldatnak a további feldolgozása azután már lényegében ismert módon, fenol-kloroform eleggyel való extrakció útján történhet. Azt találtuk, hogy különösen jó hatásfokkal választható el az oxicellulóz-oszlopról le
