150128. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vakcinák közbenső termékeinek előállítására

Megjelent: 1963. június 15. MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG •0" NJSZABADALMI LEÍRÁS ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL 150.128 SZÄM Nemzetközi osztály: A 61 k NA—629 ALAPSZÁM Magyar osztály: 30 h 1—8 Eljárás vakcinák közbenső termékeinek előállítására National Research Development Corporation cég, London (Anglia) Feltaláló: Tyrrell David Arthur John, Salisbury, Wiltshire (Anglia) A bejelentés napja: 1961. január 17. Angliai elsőbbsége: 1960. január 28. A találmány tárgya vakcinák közbenső termékeinek előállítási eljárása; közelebbről megjelölve, a találmány olyan vakcinák készítésére alkalmazható közbenső termékekre vonatkozik, amelyek segítségével bizonyosfokú immunitás biztosítható a közönséges nátha ellen. Eddig gyakorlatilag nem sikerült a közönséges nátha vírusának „in vitro" tenyésztése. Azt találtuk, hogy a közönséges nátha-vírus in vitro jól tenyészthető bizonyos olyan körülmények között, amelyek eltérnek a vírusok élő sejtekben való tenyésztésére egyébként általában alkalmazásra kerülő, szokásos körülményektől. A közönséges nátha-vírus tenyésztésének lehetővé tétele rendkívül kívánatos, minthogy e kérdés megoldása alapot nyújthat olyan, oltásokra alkalmazható vakcinák előállítására, amelyek segítségével a beoltott személynek bizonyos fokú védettséget lehet nyújtani a közönséges nátha ellen. A találmány alapját az a felismerés képezi, hogy a közönséges nátha-vírus fejlődése — legalábbis annak korai szakaszaiban — a hőmáreékleti és pH-feltételek megfelelő megválasztása útján szabályozható; az e célra alkalmazandó feltételek eltérnek a vírusok tenyésztése során általában szokásos feltételektől. Azt találtuk, hogy a közvetlenül embertől Vc-tt közönséges nátha-vírust majoim-veseszövetben vagy majom-vesesejtekben, vagy pedig e<m'r.eri embrió-veseszövetekben, ill sejtekben kell inkubáltaitni, olyan hőmérsékleten, amely alacsonyabb a vírusok tenyésztésére általában alkalmazott hőmérsékleteiknél; emellett az alkalmazandó pK-értékek a szokásosnál szűkebb tartományba esnek. A találmány tárgyát tehát olyan termék előállítására szolgáló eljárás képezi, amelyet vakcinaelőállítási közbenső termékként vagy vakcinakutatási kísérleti célokra lehet alkalmazni; az eljárás lényege az, hogy egy olyan sós közeget, amely szövetek tenyésztésére alkalmas és amelyben élő majomvese-szövetek vagy sejtek, vagy pedig élő emberi eimbrió-'vase szövetek, ill. sejtek vannak jelen, oly anyaggal oltunk be, amely a közönséges emberi nátha-vírus legalább egy törzsét tartalmazza, majd az így beoltott közeget 30 C° és 36 C° közötti hőmérsékleten inkubáltatj'Uk, 6,4 és 7,4 közötti pH-érték fenntartásával, mindaddig, míg a vírus sokszorosan 'él nem szaporodott a közegben. Az inkubáció oly módon végzendő, hogy közben biztosítsuk a közeg és a benne levő szövet, ill. sejtek viszonylagos mozgatását; ez előnyösen oly módon történhet, hogy a közeget és a szövetet, illetve sejteket tartalmazó edényt forgatjuk (vízszintes tengely körül). Az alkalmazásra kerülő pH-értők előnyösen 6,4 és 7,2 között, legcélszerűbben pedig 6,8 és 7,2 között lehet. A felhasználandó sós közeg előnyösen olyankoncentrációjú legyen, hogy lényegileg izotóniásnak legyen tekinthető; jól alkalmazható erre a célra pl. a Parker-féle „199" közeg, vagy pedig a Hank-féle sóoldat, amelyhez pl. laiktalbumin enzimes hidrolizátumát adhatjuk. Mindenesetre azonban olyan közeg alkalmazandó, amely alkalmas az élő állati sejtek, ill. szövetek in vitro fejlődésiének elősegítésére. A vírussal fertőzött anyagot közvetlenül embertől, pl. orrmosás vagy toiroköblítés útján szerez-