149771. lajstromszámú szabadalom • Eljárás C-cephalosporin kinyerésére

Megjelent: 19S2. október 31. MAGYAK NÉPKÖZTÁRSASÁG -ifc -» rs A ^ Nemzetközi osztály: C 07 g OKSZAGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL 149.771 SZAVí NA-631. ALAPSZÁM Magvai' osztály, 30 h 1—8 Eljárás C-cephalosporin kinyerésére National Research Development Corporation cég, London (Anglia) * Feltalálók: Abraham Edward Penley, Oxford (Oxfordshire), Newton Guy Geoffrey Frederick, Oxford, Hale Clifford William, Clevedon (Somerset, Anglia) A bejelentés napja: 1961. január 24. Nagy-Britannia-i elsőbbsége: 1960. január 25. A 810 196. számú angol szabadalmi leírásban ismertettük, hogy a ,.C-cephalosporin" nevő antibiotikum tiszta állapotban nyerhető ki az ezt az antibiotikumot tartalmazó nyers koncentrátumokból, különféle oldószeres frakcionálási módszerek és ioncserés kromatográfiai eljárások segítségével. A találmány tárgyát a C-cephalosporin kinyerési eljárásának tökéletesítése képezi; a találmány szerinti eljárás az eddig ajánlott módszerek — amelyek során az aktív anyagnak a fermentációs közegből történő adszorbeálására aktívszenet alkalmaztunk — hátrányainak kiküszöbölését célozza. A korábbi eljárások során a fermentációs levet szűréssel vagy centrifugálással derítettük, majd aktívszénnel hoztuk érintkezésbe, amelyről azután az abszorbeált aktív anyagot eluáltuk és alumíniumoxidot vagy anioncserélő gyantát tartalmazó oszlopon adszorbeáltattuk újból, majd erről ismét eluáltuk és ezt követően oldószeres extrákéi ós eljárásnak vetettük alá a kapott nyers hatóanyagot, amikor is a C-cephalosporin az ugyancsak jelenlevő N-cephalosporintól eltérő megoszlása alapján volt elkülöníthető. Egy másik korábban ajánlott eljárás szerint az aktívszénről, ül. az alumíniumoxid- vagy ioncserélő-oszlopról kapott eluátumban jelenlevő N-cephalosporint a megfelelő penicillinsavvá alakítottuk át azáltal, hogy az oldatot oly •hőmérsékleti és savaissági feltételeknek vetettük alá, amelyek mellett a N-cephalosporin a megfelelő penicillinsavvá alakul át, a C-cephalosporin azonban lényegileg változatlan marad; vagy pedig a pinicillináz-enzim segítségével bontottuk el a N-cephalosporint, olyan feltételek mellett, amelyek mellett, az enzim a C-eephalosporint nem támadja; meg. A C-cephalosiporint ezután elválasztottuk a N-cephalosporin-periiciilinsavtól vagy a. penicillináz hatása következtében, képződött bomlási termékektől; ez utóbbi műveleteket az említett 810 196 számú angol szabadalmi leírásban ismertetett oldószeres frakcionálással vagy ioncserés kromatográfiai módszerrel végeztük. A C-cephalosporin fenti kinyerési eljárásai meglehetősen bonyolultak, ezért megkíséreltük a C-cephalosporin közvetlen adszorpcióját a savval kezelt fermentációs léből anioncserélő gyanta segítségével, ez a közvetlen adszorpciós módszer azonban azért volt hátrányos, mert az adszorpcióhoz igen nagy mennyiségű anioncserélő gyantára volt szükség a fermentációs lében jelenlevő, a C-eephalasporintól különböző egyéb anionok jelenléte következtében, emellett az eluálás során folyamatosan eluálódott a klorid-ion is, ami azután nehézségeket okozott a C-cephalosporin kinyerési eljárásának további lépései során, minthogy e további kinyerési műveletek között szerepelt egy piridinacetáttal történő eluálási lépés is, amelynek során ebben az esetben piridin-hidroklorid jelent meg az eluátumban, amely azután az oldat betöményítése során a C-cephalosporin elbontását okozó pH-értáket idézett elő és gátolta a C-cephalosporinnak a vizes oldatból aceton hozzáadásával történő lecsapását is. A kloridionnak az oldatból való lecsapása lehetséges lett volna ezüstvegyületek segítségével, ez azonban igen költségessé tette volna az eljárást. Azt találtuk, hogy kényelmesen és igen jó eredménnyel nyerhetjük ki a fermentációs léből a C-cephalosporint, ha erős kationcserélő gyantát