147627. lajstromszámú szabadalom • Eljárás B12 vitamin és a hasznosítható B12 vitaminszerű faktorok egyidejű kinyerésére, ezeket tartalmazó koncentrátumokból
Megjelent I960, október lo. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 147.627. SZÁM 30. h. OSZTÁLY — Rí—203. ALAPSZÁM SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Eljárás Bi2-vitamin és a hasznosítható Bi 2-vitaminszerű faktorok egyidejű kinyerésére, ezeket tartalmazó koncentrá tumokból Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rí., Budapest Feltalálók: Dr. Molnár Béla kutató vegyész és Vafu József kutató vegyész, mindketten budapesti lakosok . A bejelentés napja: 1959. október 9. Pótszabadalom a 143.549 lajstromszámú törzsszabadalomhoz Az alapszabadalomban megadott eljárás alkalmas arra, hogy az elektroneutrális B12-vitamint az elektroneutrális faktoroktól megtisztítva Ph. Hg. V., ill. U. S. P. XIV. kívánalmainak megfelelő minőségben kinyerjük. A találmány bejelentéséinek, ill. gyakorlatba vételének ideje óta a Bi 2-vitaniin jelentősége világszerte fokozódott és úgy a. kutatásban, mint gazdaságilag igen jelentős fejlődésein ment át. így bebizonyosodott, hogy a methanobaktériumos fermentációban a B12-vitamint nagy mennyiségben kísérő elektroneutrális faktor úgyszólván kizárólag F III. (vagyis 5-hidroxibenzirnidazolo-cianoeobamid), ami nem hulladékanyag, hanem a Bi2-vitamirínal fiziológiai szempontból közel azonos értékű termék, és hogy a másik kísérő faktor, az aetiocobalamincarbonsav, szintén nem értéktelen, mert a 146.379 lajstromszámú magyar szabadalom szerint Bi2-vitaminná alakítható át. A szabadalom szerinti eljárást tehát úgy kell átalakítani, hogy mindhárom termék egyidejű kinyerésére alkalmas legyen. Másrészt vizsgálati módszerek fejlődése új minőségi kritériumokat hozott. Ezért a külföldi igények már az új USP XV.-ben lefektetett, lényegesen szigorúbb minőségi kritériumait kívánják. Ezeknek az újabb követelményeknek azonban — az alapszabadalom szerinti eljárással — általában nem kapunk megfelelő terméket, ezt. rendszerint át kell dolgozni. Megállapítottuk, hogy ennek két oka van. Egyik, hogy a magasszintű metanobaktériumos fermentációnál a Bi2-vitamm mellett 70—80% F III is keletkezik, míg az alapszabadalom szerinti eljárás csak 30—40% kísérő faktor maradéktalan elválasztását tudja biztosítani. Ezért csak a tisztítási eljárás megismétlésével lehet elérni, hogy a B-vitamint a jelenlegi magas arányban kísérő F III mellől is tisztán ki lehessen reparálni. Ezenkívül az alapszabadalom szerint készült termékben újabban megállapítottuk egy új faktor jelenlétét, ami valószínűleg azonos az irodalomban (F. B. Brown &.: Biochem. J. 59, 84, 1955.) „E faktor" néven leírt ismeretlen nukleotidot tartalmazó B ^-analóggal. Ez a faktor biológiailag inaktívnak látszik, tulajdonságait és felhasználási területét még nem ismerjük, a magas, szintű metihanobaktériumos fermentációban csak pár százalékban, van jelen. a jelen eljárás szempontjából az. a fontossága, hogy a B] 2-vel elegy-kristályokat tud képezni és rendkívül kis mennyiségű jelenléte is már az: új U. S. P. XV. szennyezettségi vizsgálat módszerénél ihatározottan jelentkezik. Tehát az új minőségi kritériumoknak a Bi2-vitamin csak akkor felel meg, ha e faktor nyomait, nem tartalmazza. A jelen találmány tárgyát tehát a Bi2-vitamin és az elektroneutrális faktorok törzsszabadalom szerinti elválasztási eljárásinak olyan módosítása, ill. továbbfejlesztése1 képezi, amelynek segítségével az említett, szigorú minőségi követelményeknek megfelelő tisztaságban, mindenfajta kísérő faktortól gyakorlatilag mentesen nyerhetjük ki a Bi 2-vitamint és egyúttal tiszta állapotban nyerhetjük ki az, értékes kísérő faktorokat, az F III. faktort és az, etiokobalaminkarbonsavat is, oly módon, hogy e termékeik egyike se tartalmazzon a másik két, ugyancsak értékes termékből sem 1— 2%-ot meghaladó mennyiséget. Ezt az eddig ismert eljárásokkal megoldhatatlan specifikus szétválasztást . is, nagyfokú tisztítást az az új felismerésünk tette lehetővé, amely szerint, a törzsszabadalom szerinti eljárás egyik lényeges lépése, a fenol-kloroformos kirázásban az oldószeres fázis arányának, és ebben a fenol koncentrációnak- a megfelelő változtatása és egyidejűleg
