141384. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gombák és egyéb mikroorganizmusok tenyésztésére és ezek által termelt anyagok előállítására
Megjelent 1952. évi július hó 1-én. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 141384. SZÁM. 30 h, 1—8. OSZTÁLY. — BJ-25. ALAPSZÁM. Eljárás gombák és egyéb mikroorganizmusok tenyésztésére és ezek által termelt anyagok előállítására. Központi Biokémiai Ipari Kutató Laboratórium. A bejelentő által megnevezett feltaláló: Dr. Johan Béla. A bejelentés napja: 1950. április 17* Mikroorganizmusoknak erjesztés céljából történő tenyésztésére többféle táptalaj ismeretes. Egyik a szintetikus, a máisik a természetes táptalajok csoportja, alkalmazzák a kettőnek kombinációit is. A természetes táptalaojk közül antibiotikumok, különösképen pedig a penicillin erjesztés útján történő termelésével kapcsolatban legjobban ismert a kukoricakeményítő gyártás melléktermékeiként nyert kukorica áztatólé, vagy pedig ennek besűrítése útján nyert szirup. Újabb és az eddigieknél jobb, természetes táptalajok utáni kutatásaink során azt találtuk, hogy különböző gombáknak erjesztés céljából történő tenyésztésére és a tenyésztés útján történő antibiotikum előállítására igen előnyösen használhatunk olyan táptalajokat, melyekbe a gombák növekedéséhez és az antibiotikum termeléséhez szükséges nitrogént és a növekedést elősegítő anyagokat búzasikér vagy részben vagy egészen lebontott búzasikér formájában visszük bele. Azt találtuk, hogy a részben lebontott és különösképen az olyan búzasikér. melyet természetes mikroorganizmus flórája lebontó hatásának tesznek ki 5—10 napig, 25— 30°-on, mialatt kissé el is folyósodik, igen előnyösen használható mikroorganizmusok és. különösképen penészgombák tenyésztésére és a tenyészet segítségével antibiotikumok előállítására. Használhatjuk a részben lebontott búzasíkért szokásos kereskedelmi formájában, szárított csiriz alakjában is. Akár a búzasikért, akár a részben lebontott és elfolyósodott búazsikért, akár pedig a száraz terméket, a csirizt használjuk, a tápoldatra, száraz anyagban számítva 0,5—3 %-nyi menynyiség alkalmazása a legcélszerűbb. Kísérleteink során azt találtuk, hogy a búzasikért, vagy az abból nyerhető, többé vagy kevésbbé lebontott termékeket igen előnyösen használhatjuk fel Pénicillium chrysogénum tenyésztésére és a tenyészet segítségével penicillinnek és különösképen G-penicillinnek előállí—« t ru ,-Ai Mkalmazhatók az ilyen táptalajok Streptomycce griseus tenyésztésére é>s erjesztés útján történő streptomycin előállítására is. Igen előnyös foganatosítása a jelen találmány szerinti eljárásnak az, hogy a természetes mikroorganizmusok flórája ' lebontó hatásának néhány napig 20—25°-on kitett és kissé elfolyósodott búzasikért (az ú. n. csirizt) használunk fel a tápoldatra számított 0,5—3 %-nyi száraz anyag mennyiségben Pénicillium chrysogénum tenyésztésére és a tenyészet segítségével penicillinnek, különösképen G-penicillinnek előállítására. De a búzasikért, vagy az abból nyerhető részben vagy egészben lebontott termékeket tartalmazó táptalajok egyéb gombák és általában mikroorganizmusok tenyésztésére is. A részben lebontott búzasikért úgy állíthatjuk elő, hogy 5—10 napig 20—25°-on hagyjuk állni a búzasikért, amikoris az a természetes mikroorganizmus flórájának hatására részben lebontódik és elfolyósodik. Az így nyert anyag átlagban 35 % száraz anyagot és 4,4k % nitrogént tartalmaz. Az ammino nitrogén tartalma van Slyke szerniti meghatározás alapján 0,26%. Keményítő igen kevés van benne. Példa: ’ Pénicillium chrysogénus tenyésztésére és abból penicillinnek előállítására az alábbi összetételű tápoldatot használhatjuk: 1 liter tápoldatra: A fent ismertetett módon előállított lebontott búzasikérbő] 55 w, laktóz 40 g, káliumdihidrofoszfát 1 g, kristályos megnéziumszulfát 0,25 g, kristályos cinkszulfát 0,025 g, fenilecetsav .0,5 g, és kalciumkarbonát 10 g. A fenti összetételű tápoldatot sterilizálás után beoltjuk a Pénicillium chrysogénumnak mycélium szuszpenziójával és azután keverés mellett több napon át steril levegőt fuvatunk át a reakció elegyen. Ily módon az 5 literes fermentátorban, 7 napi erjesztés után Bacilus Subtilisszal mérve 1680 E/cm’, Staphylococcus
